【摘要】：微小按蚊是我国重要的疟疾传播媒介，室内滞留喷洒和拟除虫菊酯杀虫剂浸泡蚊帐是重要的防治措施，我国云南一直在应用该化学方法防制。有报道称已发现微小按蚊对拟除虫菊酯杀虫剂产生了抗药性，有研究认为我国云南的微小按蚊A和C型吸血行为和栖息行为也有所差异，但更进一步的行为差异，特别是应用杀虫剂之后，在杀虫剂压力下微小按蚊对杀虫剂抗药性与吸血和栖息行为的关系，还有待于深入研究。 1.微小按蚊分子分型 微小按蚊复合组成员，以及几种亲缘相近的蚊种具有相近的外形特征，在外形上容易混淆，，形态学鉴定容易出现错误。该复合组迄今已记录有微小按蚊A、B、C、D、E，我国云南南部主要为A型、C型，近年也有A/C混合型微小按蚊的报道。先对做采集的蚊虫进行形态学分型，再用PCR方法对捕获的微小按蚊进行分子分型。An. minimus A364只，An. minimus C593只，An. jeyporiensis19只，An.aconitus15只，另有2只疑似为微小按蚊A/C混合型，54只不是微小组按蚊种团成员。 2.微小按蚊栖息习性研究 在东方红村选取若干牛圈和人房为采样点，使用诱蚊灯采集成虫，每日19:00挂灯开始采集，次日8:00收集蚊虫。对各个诱蚊灯所采集蚊虫进行分别计数。经过spss软件统计分析得出结论An. minimus A偏好栖息人房；而An. minimus C偏好栖息于牛圈。 3.微小按蚊吸血习性研究 根据东方红村的实际情况调查当地的主要动物血源为牛、猪和鸡，再加上人血源，设计特异性引物，鉴别捕获蚊虫胃血来源。结果经spss软件分析，An.minimus A无明显的吸血偏好；而An. minimus C偏好吸食牛血。 4.微小按蚊钠通道基因序列研究 登录GenBank可以查询到An. minimus钠离子通道部分编码序列区(CDS)片段序列（GenBank: GU064930.3）和para型钠离子通道基因序列（GenBank:EU155386.1）。根据para型钠离子通道基因序列设计引物扩增An. minimus的ⅡS6区段序列并测序，共测序微小按蚊736只，其中415只测序结果理想，比对结果显示在常见kdr突变的1014位点并没有发现突变，提示该地区微小按蚊的击倒抗性很低或并没有产生击倒抗性。 5.微卫星位点多样性检测结果及分析 登录GenBank可以查询到An. minimus已有28条微卫星序列，编号为：HQ839797.1、HQ839799.1、HQ839801.1、HQ839803.1、HQ839797.1、HQ839795.1、HQ839793.1、 HQ839793.1、 HQ839789.1、 HQ839816.1、 HQ839814.1、HQ839810.1、 HQ839812.1、 HQ839808.1、 HQ839806.1、 HQ839804.1、HQ839802.1、 HQ839802.1、 HQ839798.1、 HQ839796.1、 HQ839794.1、HQ839792.1、HQ839792.1、HQ839815.1、HQ839813.1。根据以上序列设计引物，其中AM4、AM7-1、AM8、AM12、AM21、AM23、AM25-1和AM27-1，八个位点扩增出清晰的条带，测序结果理想，可用于微卫星数据分析。将采集蚊虫分为八个组：A组为An. minimusA（云南东方红村），B组为An. minimus C（云南东方红村），C组为An. jeyporiensis（云南龙塘村），D组为An.aconitus（海南牙营村），E组为An. aconitus（云南龙塘村），F组为An. minimusA（云南龙塘村），G组为An. minimus C（云南龙塘村），H组为An. minimus A（海南牙营村），用微卫星标记对这些组的期望杂合度与观察杂合度、多态性信息含量、哈迪-温伯格平衡分析、群体内的近交系数、群体分化系数等多方面分析，并对微小按蚊种团进行聚类。各个位点期望杂合度与观察杂合度的值非常相似，说明这些标记具有良好的多态性，适用于群体分析。实验用8个按蚊种群间的生物多样性很好，各个位点的平均多态信息含量处于0.53～0.77之间，云南龙塘村捕获的An.aconitus遗传多样性略低，但都0.5，仍然比较丰富。哈迪-温伯格平衡检验结果各种群存在多位点的杂合子缺失，偏离了哈迪-温伯格平衡标准，总的群体遗传分化系数Fst=0.1386，各种群之间基因交流较少。聚类分析结果表明同种之间距离接近，微小按蚊A型、C型与乌头按蚊距离接近，与杰普尔按蚊距离较远，符合微小按蚊种团的基本情况。
[Abstract]:......
【学位授予单位】：中国人民解放军军事医学科学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2012
【分类号】：R384.1
【参考文献】
相关期刊论文 前10条
1 陈永久,王学忠,王丕玉,张亚平;云南微小按蚊随机扩增多态DNA及遗传分化关系[J];动物学研究;1998年03期
2 邢剑飞;刘艳;颜冬云;;昆虫对拟除虫菊酯农药的抗性研究进展[J];环境科学与技术;2010年10期
3 郑彬;汤林华;王学忠;马雅军;周水森;施文琦;;云南省微小按蚊A、C种群密度高峰及嗜血习性的观察[J];国际医学寄生虫病杂志;2006年04期
4 郭凤英,吴厚永,李承毅;我国蚊虫对拟除虫菊酯类杀虫剂抗性的研究进展[J];寄生虫与医学昆虫学报;2002年01期
5 史慧勤,赵彤言,陆宝麟;微小按蚊种团及微小按蚊复合体分类研究进展[J];寄生虫与医学昆虫学报;2002年02期
6 史慧勤,赵彤言,朱礼华,王善青,陆宝麟;微小按蚊复合体rDNA-ITS2序列差异及遗传多态性研究[J];寄生虫与医学昆虫学报;2003年02期
7 吴家红,赵彤言,董言德,陆宝麟;埃及伊蚊钠通道基因克隆与序列分析[J];寄生虫与医学昆虫学报;2004年01期
8 曹晓梅,宋锋林,赵彤言,董言德,孙晨熹;Kdr等位基因频率与家蝇对溴氰菊酯抗性的关系[J];寄生虫与医学昆虫学报;2004年04期
9 宋锋林,赵彤言,董言德,曹晓梅,张晓龙;淡色库蚊(Culexpipienspallens)与击倒抗性(kdr)相关的钠通道基因突变[J];寄生虫与医学昆虫学报;2005年02期
10 马彩霞,李梅,邱星辉,何凤琴,刘惠霞;用mRNA RT-PCR差异显示技术克隆拟除虫菊酯抗性家蝇细胞色素P450基因片段[J];寄生虫与医学昆虫学报;2005年04期
本文编号：
2381125
本文链接：https://www.wllwen.com/xiyixuelunwen/2381125.html
