不同发育期大鼠血液及主要脏器中内皮祖细胞数量和功能的变化规律

发布时间：2019-02-12 21:22

【摘要】：目的： 1.观察不同发育阶段大鼠外周血和主要脏器包括心、肝,肺、大脑、肾脏中内皮祖细胞(EPCs)数量的变化。 2.探讨不同发育阶段大鼠外周血和主要脏器包括心、肝,肺、大脑、肾脏中EPCs功能的变化。 3.明确在不同发育阶段大鼠外周血和主要脏器包括心、肝,肺、大脑、肾脏中EPCs可能存在的差异和功能变化及衰老程度,为探索EPCs可能与年龄相关性疾病的发生和发展的关系及为EPCs的临床应用寻找更理想的种子细胞奠定基础。 方法： 1.选取育龄Wistar大鼠6只(4只雌性,2只雄性),做近交系培养,于三代以后在子系中继续挑选种鼠做近亲繁殖,并在发育过程中根据实验需求分批挑选健康大鼠按实验设计分组饲养,到达预定时间后按实验方案取材检测；选取0.5月龄、2月龄、8月龄及18月龄Wistar雄性大鼠各10只,2%戊巴比妥纳麻醉后,腹主动脉取血(EDTA.K2抗凝),同时取主要脏器包括心、肝,肺、大脑、肾脏的同部位等重各组织制备成单细胞悬液,以CD34-FITC和CD133-PE双染标记后用流式细胞术检测血及组织悬液中EPCs数目；另取各组大鼠心、肝,肺、大脑、肾脏的相同部位各组织制备成病理腊块,戳取每个组织的相同部位制备成组织芯片,免疫组化法检测组织中CD34和CD133染色阳性EPCs; 2.酶联免疫吸附试验(Elisa法)检测各组大鼠血浆中VEGF和NOS水平,检测大鼠心、肝,肺、大脑、肾脏的相同部位等重组织中β-半乳糖苷酶的含量。 结果： 1.2月龄和8月龄大鼠循环血及大鼠心、肝,肺、大脑、肾脏EPCs流式检测数量明显高于0.5月龄组(P0.05)；2月龄和8月龄组相比无明显差异(P0.05)；18月龄组与2月龄和8月龄组比较则明显减少(P0.05)；0.5月龄组与18月龄组比较无统计学意义(p0.05)。 2.2月龄和8月龄大鼠外周血及大鼠心、肝,肺、大脑、肾脏EPCs免疫组化染色阳性表达明显高于0.5月龄组(P0.05)；2月龄和8月龄组相比无明显差异(P0.05)；18月龄组与2月龄和8月龄组比较则明显减少(P0.05)；0.5月龄组与18月龄组比较无统计学意义(p0.05)。 3.血浆中VEGF水平及NOS的水平在老年大鼠明显减弱,2月龄和8月龄比较变化不明显(P0.05),0.5月龄最高；大鼠心、肝、肺、脑、肾脏的相同部位各组织中β-半乳糖苷酶的水平逐渐增高。 结论： 1.流式细胞术检测：随着大鼠的生长发育,外周血中EPCs数量呈规律性变化,乳鼠组和老年组较少,而青、中年组较多； 2.免疫组化检测显示：随着大鼠的生长发育,主要脏器包括心、肝、肺、大脑、肾中EPCs数量呈规律性变化,0.5月龄组和18月龄组较少,而2、8月龄组较多；大鼠体内EPCs数目的变化可能与生长发育阶段有密切的关系； 3.血浆中VEGF和NOS水平逐渐减弱反应内皮祖细胞的功能逐渐减弱,大鼠心、肝,肺、大脑、肾脏的相同部位各组织中β-半乳糖苷酶的水平逐渐增强反应内皮祖细胞在机体不同发育阶段不断衰老。 4.0.5月龄组与18月龄组大鼠外周血及主要脏器内皮祖细胞的数量虽然相近,但18月龄组功能却明显衰退。
[Abstract]:......
【学位授予单位】：兰州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2012
【分类号】：R363

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本文编号：2420801