新城疫病毒核蛋白单克隆抗体的制备及双抗体夹心ELISA的初步建立

发布时间：2019-05-06 07:09

【摘要】：目的制备新城疫病毒(NDV)核蛋白(NP)的单克隆抗体(单抗),并用于建立一种可定量检测NDV病毒含量的双抗体夹心酶联免疫吸附试验检测方法(NDV NP ELISA)。方法基于NDV病毒株F48E9获得NP基因,经原核表达方式制备出重组抗原rNP;免疫小鼠制备NDV NP特异性单抗;单抗经HRP标记和配对筛选,建立NDV NP ELISA,分析其特异性、灵敏度、精密度、准确度和检测线性,并分析本方法定量检测的NP含量与PFU病毒滴度的定量相关性。结果建立基于单抗3C10和4E7的NDV NP ELISA,其定量检测NDV rNP的最佳线性范围为0.015~0.250μg/ml(R2=0.9974),回收率在88.4%~106.01%,变异系数小于3.4%;该方法具有良好特异性;该方法定量检测NDV抗原含量与PFU病毒感染滴度有较好的相关性(R2=0.9209)。结论建立NDV NP ELISA,可准确定量检测NDV病毒中的NP抗原含量,为NDV病毒含量的测定提供一种可靠简便的分析方法。
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【作者单位】： 厦门大学国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心生命科学学院;厦门大学分子疫苗学与分子诊断学国家重点实验室公共卫生学院;
【基金】：国家自然科学基金(31670934):基于广谱中和单抗的通用型流感疫苗设计及其结构基础研究~~
【分类号】：R392-33

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本文编号：2469979