重组可溶性MICA蛋白对NK细胞NKG2D受体表达的影响

发布时间：2019-06-02 16:30

【摘要】：目的：NK细胞是机体固有免疫的主要效应细胞,NK细胞NKG2D受体与其配体MICA的识别在白血病的免疫监视中发挥重要作用,但是白血病细胞仍能逃逸NK细胞的这一免疫监视作用,考虑与肿瘤细胞表面MICA配体脱落形成可溶性MICA有关。因此,我们在体外研究重组可溶性MICA蛋白对NK细胞NKG2D的表达、杀伤活性及分泌IFN-γ的影响。探讨可溶性MICA在白血病免疫逃逸机制中的作用,为白血病免疫治疗寻找新的方向。 方法：Ficoll密度梯度离心法分离健康人外周血单个核细胞(PBMNC),运用免疫磁珠阳性分选NK细胞。流式细胞仪鉴定其纯度。将培养NK细胞分为空白对照组及实验组。空白对照组加等体积的完全培养基,实验组分别加不同浓度重组sMICA200μg/L、500μ、g/L、800μg/L,与NK细胞孵育过夜后,收集NK细胞,流式细胞仪检测其NKG2D受体表达水平,收集培养上清用-LISA试剂盒检测分泌IFN-γ水平,并向孵育后的NK细胞中加入K562细胞作用4小时,用LDH释放法检测NK细胞对其杀伤活性。 结果：经免疫磁珠分选后NK细胞纯度达90%以上。重组sMICA200μg/L、500μg/L、800μg/L组NK细胞NKG2D的表达水平、对靶细胞的杀伤活性、IFN-γ分泌水平均明显低于空白对照组,差异有统计学意义(P0.05)。且随重组sMICA浓度增加,NK细胞NKG2D的表达水平、对靶细胞的杀伤活性、IFN-γ分泌水平均逐渐降低,不同浓度组间比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论：重组可溶性MICA蛋自可下调NK细胞NKG2D表达；抑制杀伤活性；降低IFN-γ分泌水平；急性白血病细胞表面脱落的sMICA蛋白损害NKG2D-MICA的抗白血病效应,这一机制可能与急性白血病免疫逃逸有关。以NKG2D-MICA为基础的白血病免疫治疗方法值得深入研究。
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【学位授予单位】：兰州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2012
【分类号】：R392

【参考文献】

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本文编号：2491266