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鼠伤寒沙门氏菌STM1697蛋白的原核表达及纯化

发布时间:2019-06-26 09:42
【摘要】:目的原核表达并纯化沙门氏菌毒性相关蛋白STM1697,为其功能研究奠定基础。方法以鼠伤寒沙门氏菌(ATCC14028)基因组为模板,PCR扩增STM1697基因,双酶切后连接到原核表达载体pGL01中。将阳性重组子转化入大肠埃希菌BL21(DE3)以IPTG诱导,表达产物经镍离子亲和柱进行纯化,并用SDS-PAGE分析鉴定蛋白及纯度。结果成功将STM1697基因克隆到原核表达载体pGL01中。STM1697蛋白在大肠埃希菌BL21(DE3)以可溶形式表达,经镍离子亲和柱纯化后得到的蛋白纯度95%。结论伤寒沙门氏菌STM1697蛋白在大肠埃希菌中可稳定表达,为其功能研究奠定了基础。
[Abstract]:Objective To express and purify the Salmonella toxicity-related protein STM1697, and lay a foundation for its functional research. Methods The genome of Salmonella typhimurium (ATCC14028) was used as a template, and the STM1697 gene was amplified by PCR and then ligated into the prokaryotic expression vector pGL01. The positive recombinants were transformed into E. coli BL21 (DE3) to be induced by IPTG. The expression product was purified by the nickel ion affinity column and the protein and the purity were identified by SDS-PAGE. Results The STM1697 gene was successfully cloned into the prokaryotic expression vector pGL01. The protein of STM1697 was expressed in a soluble form in E. coli BL21 (DE3), and the purity of the obtained protein was 95%. Conclusion Salmonella typhimurium STM1697 protein can be stably expressed in E. coli, and lays a foundation for its functional research.
【作者单位】: 山东省医学科学院基础医学研究所;济南大学山东省医学科学院医学与生命科学学院;
【基金】:国家自然科学基金项目(No.31500050)
【分类号】:R378

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本文编号:2506099


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