miRNA慢病毒表达载体的构建及其在原代培养的大鼠胚胎大脑皮层神经细胞中的稳定表达

发布时间：2019-09-03 20:19

【摘要】：目的:构建miRNA的慢病毒表达载体,使其在原代培养的大鼠胚胎大脑皮层神经细胞中稳定表达。方法:将该干扰片段构建入慢病毒载体(pL KD-Ubc-eG FP-U6-shRNA)的U6启动子下游,该载体可以实现在干扰小片段RNA的同时表达绿色荧光蛋白EGFP基因,便于观察载体工作状态。通过脂质体转染法转染原代培养的大鼠胚胎大脑皮层神经细胞,观察转染的原代培养的大鼠胚胎大脑皮层神经细胞的形态及表达情况。结果:针对筛选的miRNA构建的慢病毒载体,经过DNA测序结果和琼脂糖凝胶电泳鉴定成功构建了筛选的miRNA的慢病毒表达载体,重组质粒转染原代培养的大鼠胚胎大脑皮层神经细胞,经24 h后在荧光倒置显微镜下可以观察到部分细胞带有绿色荧光,筛选的miRNA构建的慢病毒载体在原代培养的大鼠胚胎大脑皮层神经细胞中稳定表达。结论:筛选的miRNA的慢病毒表达载体构建成功,并稳定的转染到原代培养的大鼠胚胎大脑皮层神经细胞中,为miRNA对神经细胞存活功能的研究提供了平台。
【作者单位】： 新疆医科大学基础医学院;新疆医科大学中心实验室;新疆医科大学附属肿瘤医院;
【基金】：国家自然科学基金(81460359)
【分类号】：R321

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 杨翠,赵晏,王会生,徐磊;谷氨酸介导的大脑皮层神经细胞凋亡[J];西安医科大学学报;2001年03期

2 吴希如,马守兴,倪力,刘鼎新;酪氨酸对原代培养的胚鼠大脑皮层神经细胞的影响[J];北京医科大学学报;1986年01期

3 戴玉英,陈占红;谷氨酸对培养大鼠皮层神经细胞损伤作用的研究[J];浙江创伤外科;2001年05期

4 于丽华,赵书平,程薇莉;新生大鼠大脑皮层神经细胞培养及影响因素[J];实用医药杂志;2005年10期

5 吴希如,张一,马守兴,刘慎如,倪力,于凤霞,曹杰,左锐,李俊如;胚鼠大脑皮层神经细胞的体外原代分离单层培养方法[J];北京医学院学报;1983年03期

6 侯红梅;董文斌;王琼;陈枫;航永伦;;促红细胞生成素对谷氨酸致培养皮层神经细胞损伤的保护作用[J];中华围产医学杂志;2006年05期

7 母敬郁，熊文，，杨世杰，李天威，杨翰仪;自由基介导兴奋性氨基酸对培养皮层神经细胞毒性的研究[J];中风与神经疾病杂志;1996年01期

8 朱晓峰,张拥波,夏一鲁,张晓梅;大脑皮层神经细胞低密度原代培养[J];黑龙江医药科学;1999年06期

9 陈勤;李磊珂;;远志皂苷对β淀粉样蛋白1-40诱导的体外培养皮层神经细胞损伤的保护作用[J];中国中药杂志;2007年13期

10 于丽华,赵书平,席先成,崔洪新;不同种类血清对新生大鼠大脑皮层神经细胞培养的影响[J];实用医药杂志;2002年03期

相关会议论文 前10条

1 周江堡;刘瑛;;八肽胆囊收缩素在皮层神经细胞凋亡中保护作用的研究[A];中华医学会第十四次全国儿科学术会议论文汇编[C];2006年

2 陈勤;李磊珂;;远志皂苷对β淀粉样蛋白1-40诱导的体外培养皮层神经细胞损伤的保护作用[A];2006第六届中国药学会学术年会论文集[C];2006年

3 陈勤;李磊珂;;远志皂苷对β淀粉样蛋白1-40诱导的体外培养皮层神经细胞损伤的保护作用[A];中华中医药学会中药实验药理分会第六届学术会议论文汇编[C];2006年

4 郑莉;刘国卿;;洛美利嗪对谷氨基酸致原代培养大鼠皮层神经细胞损伤的影响[A];第六届全国药理学教学学术会议论文摘要汇编[C];2003年

5 聂荣庆;胡国柱;张进;吴东风;李扣华;文珠;杨新跃;;黄芪抗新生大鼠大脑皮层神经细胞缺氧性凋亡研究[A];中国中西医结合学会第七次全国实验医学学术研讨会论文汇编[C];2004年

6 石进峰;张博爱;贾延R

本文编号：2531559