慢性高原病大鼠模型HIF-2α及sTfR表达水平的研究

发布时间：2017-03-17 22:01

  本文关键词：慢性高原病大鼠模型HIF-2α及sTfR表达水平的研究，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：背景:CMS严重危害着高原人群的健康,至今仍未明确其发病机制。有研究显示HIF对铁代谢的调控在CMS发病机制中发挥着重要作用。缺氧条件下,HIF-2可能通过与TfR基因转录起始位点上游的HRE结合调控TfR的表达。亦有观点认为调控铁代谢的是HIF-1。前期的研究中已表明缺氧显著改变了铁的代谢,但是HIF在CMS中对铁代谢的调节途径尚未完全阐明。目的:本课题通过检测CMS大鼠模型肝脏组织中HIF-2α的mRNA及蛋白水平,血清中sTfR、SF的水平,研究CMS发病的可能机制,进一步探讨HIF-2及铁代谢相关指标与CMS的相关性,为CMS患者进行临床干预提供新的依据。方法:将50只健康雄性SPF级SD大鼠,从西安运至西宁,适应性喂养1周后进行实验。将大鼠随机分为6组:低氧7天、15天、30天(CMS)组,常氧7天、15天、30天组。分别于7天、15天、30天后麻醉大鼠,进行检测:1.血常规检测及比浊法测SF;2.采用qRT-PCR法检测肝脏组织HIF-2α的mRNA水平;3.采用IHC法检测肝脏组织HIF-2α的蛋白水平;4.采用ELISA法检测血清中sTfR的蛋白水平;5.实验数据采用SPSS19.0统计软件,两组间比较采用独立样本t检验,多个样本均数比较采用方差分析。相关性分析采用Pearson相关分析。以α=0.05为检验水准。结果:⑴HIF-2αmRNA表达水平,低氧30天(CMS)组高于低氧7天组(P0.05),低氧30天(CMS)组明显高于常氧30天组(P0.01)。⑵HIF-2α蛋白水平,低氧7天组低于低氧15天组及低氧30天(CMS)组(P0.05);低氧30天(CMS)组高于常氧30天组(P0.01)。⑶sTfR蛋白表达水平,低氧30天(CMS)组高于低氧7天组(P0.05),低氧三组均高于各自常氧对照组(P0.01)。⑷HIF-2α蛋白表达水平与sTfR表达水平无相关性。结论:低氧条件下HIF-2α与sTfR随缺氧时间的增加,其表达逐渐增加,且在CMS中维持高表达,可能与红系过度增生及对铁的需求增高有关。HIF-2α与sTfR表达水平无相关性,可能系sTfR受多种调节因素相互作用的结果。
【关键词】：慢性高原病 缺氧诱导因子-2α 可溶性转铁蛋白受体 血清铁蛋白
【学位授予单位】：青海大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R594.3;R-332
【目录】：

• 摘要4-5
• Abstract5-9
• 主要符号对照表9-11
• 第1章 引言11-14
• 第2章 材料与方法14-23
• 2.1 材料14-16
• 2.1.1 实验动物14
• 2.1.2 主要试剂14
• 2.1.3 主要仪器设备14-15
• 2.1.4 主要分析软件15-16
• 2.2 方法16-23
• 2.2.1 技术路线16
• 2.2.2 引物设计与合成16-17
• 2.2.3 大鼠分组及CMS模型制备17
• 2.2.4 取材17
• 2.2.5 qRT-PCR法检测大鼠肝脏组织mRNA水平17-20
• 2.2.6 IHC检测大鼠肝脏组织HIF-2α的蛋白水平20-21
• 2.2.7 ELISA法检测血清sTfR的含量21-22
• 2.2.8 统计学方法22-23
• 第3章 实验结果23-34
• 3.1 第一部分：大鼠一般资料23-25
• 3.2 第二部分：大鼠肝脏组织HIF-2α mRNA水平25-29
• 3.2.1 大鼠肝脏组织总RNA提取25-26
• 3.2.2 HIF-2α mRNA水平测定结果26-29
• 3.3 第三部分：大鼠肝脏组织HIF-2α蛋白水平29-32
• 3.4 第四部分：大鼠血清sTfR蛋白水平32-33
• 3.5 第五部分：指标间的相关性分析33-34
• 第4章 讨论34-40
• 第5章 结论40-41
• 参考文献41-44
• 致谢44-45
• 附录A 文献综述45-54
• 参考文献51-54
• 附录B 数据资料54-65
• 作者简介65

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前7条

1 任sズ

本文编号：253479