人精子表面乳铁蛋白受体的分子特性研究

发布时间：2020-01-17 11:56

【摘要】：目的:为了研究人类精子表面是否存在乳铁蛋白的受体(LfR)及其在精子表面的定位和生物学特性。 方法:设计合成LfR的特异性引物,从睾丸cDNA文库中用聚合酶链反应技术(PCR)扩增该蛋白受体的基因产物,体外用EscherichiacoliBL21 (DE3)载体表达重组LfR的重组蛋白质;收集正常人的精液,用非连续密度梯度法把精子从精液中分离,提取精子表面蛋白质,用免疫印迹法检测精子表面是否存在天然LfR;用Lf和LfR重组蛋白进行Far-western印迹法证实两者相互作;用免疫共沉淀和放射自显影分析Lf和LfR的结合以及用免疫荧光来定位LfR在精子表面的位置。 结果:人类睾丸文库含有LfR的基因,重组LfR蛋白Mr 34,000Da。人类精子天然LfR蛋白Mr136,000Da。人类精子表面存在LfR,该受体以四倍体分子形式靠GPI连接在精子膜表面的头部和中段。体外研究证实,Lf与LfR竞争性地相结合。 结论:在精子表面,Lf与LfR相结合,LfR可能在介导Lf的功能方面发挥重要作用。
【学位授予单位】：南京医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2011
【分类号】：R346

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