LPS及TOLL样受体4阻断剂对蜕膜细胞中PR及IL-1β、COX-2影响的研究
发布时间:2020-02-18 19:59
【摘要】:目的: 旨在研究脂多糖(LPS)及其拮抗剂TOLL样受体4阻断剂(TLR4mAb)作用于体外培养的蜕膜细胞后孕激素受体(PR)、 IL-1β及COX-2的表达情况,以探讨脂多糖及其拮抗剂对蜕膜细胞中孕激素受体的影响,和孕激素受体与炎症因子之间的关系。 方法: 分离培养人早孕蜕膜细胞,当细胞传代至3-4代时,采用HE染色观察细胞形态、免疫荧光技术鉴别细胞纯度,将蜕膜细胞随机分为6组:分别用0ug/ml、1ug/ml和3ug/ml终浓度TLR4mAb各2孔预处理细胞24小时,再用Ong/ml、100ng/ml LPS分别加入三组TLR4mAb中作用24小时。用MTT技术检测细胞存活及生长率、RT-PCR半定量技术,检测PR、 IL-1β及COX-2mRNA的表达变化。 结果: 1.免疫荧光示,蜕膜细胞传到3-4代时体积较第一代增大,胞核更明显且纯度更高,镜下形态一致性高。 2.MTT实验示,与对照组比较LPS抑制细胞生长(P0.05);TLR4mAb促进细胞增殖,且一定浓度的TLR4mAb能够在一定程度上拮抗LPS对细胞生长的抑制作用(P0.05),无统计学意义。 3.RT-PCR实验示: (1)LPS使蜕膜细胞中PR mRNA的表达下调(P0.05),使IL-1β和COX-2mRNA的表达上调(P0.05); (2)TLR4mAb使蜕膜细胞中PR和COX-2mRNA的表达无统计学意义(P0.05),使IL-1β mRNA的表达下调(P0.05); (3)TLR4mAb则使LPS作用后的蜕膜细胞中PR mRNA的表达上调(P0.05)、 IL-1βmRNA的表达下调(P0.05);高浓度TLR4mAb使COX-2mRNA的表达下调(P0.05)。 结论: LPS作用于体外培养的人蜕膜细胞后, PR mRNA表达下调;IL-1β、 COX-2的1mRNA表达增加;使用TOLL样受体4阻断剂后能拮抗LPS对蜕膜细胞中IL-1β、 COX-2的作用。
【学位授予单位】:中南大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2012
【分类号】:R321
本文编号:2580803
【学位授予单位】:中南大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2012
【分类号】:R321
【参考文献】
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,本文编号:2580803
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