两种损伤模型运动功能评分（BBB）比较及超短波对脊髓损伤后内源性神经干细胞存活和分化的影响

发布时间：2020-03-19 04:11

【摘要】：目的:1.观察半横断损伤和Allen’s法脊髓损伤后BBB评分的异同。2.观察脊髓损伤后内源性神经干细胞的存活和分化为星形胶质细胞的变化,并且观察超短波对这一变化的影响。方法:1.分别用两种不同的损伤方式对随机分组的20大鼠进行脊髓损伤,并且在损伤后的第1、3、5、7、14天进行BBB评分,观察后肢运动恢复的异同。2.用46只SD大鼠,被随机分成3组:假手术组,只暴露硬脊膜,不给予打击;对照组,给予Allen’s打击,并不做任何治疗;治疗组,给予Allen’s打击,并在SCI后24小时开始给予小剂量超短波(11 W)治疗,每日一次7min直至取材前。大鼠的运动功能用BBB评分进行评定,大鼠取材后分别对组织进行横向切片,分别进行HE和免疫荧光染色,来检测脊髓形态和Nesin、GFAP在组织内的表达部位和表达量,以观察内源性神经干细胞在脊髓损伤后并超短波治疗后存活和分化为星形胶质细胞的情况。结果:实验的结果显示,(1)Allen’s法脊髓损伤相比,半横断在损伤后5天恢复速度加快,在第7天的时候超过了前者,并且在第14天这一差异有统计学意义(p0.05)(2)BBB评分显示,3天后后肢功能评分逐渐恢复。治疗组与对照组相比,3天、5天和7天的BBB评分并没有显著的差异,直到14天,治疗组的后肢功能BBB评分高于对照组,并且差异显著(p0.05)(3)HE染色:在第3天,超短波治疗组与对照组相比,脊髓组织出血较多,但是在第7天和14天,组织坏死的范围较对照组小。(4)Nestin、GFAP、NeuN免疫荧光染色:在脊髓中央管,Nestin+细胞在损伤后第3天表达最多,并且随着损伤后时间的推迟,Nestin+细胞的表达量却是逐渐减弱的,到第14天表达水平与假手术组相当。GFAP+细胞在第7天表达最强,并且与Nestin共染的区域(黄色荧光)也是最多的。在损伤周围区白质,损伤头端和尾端的表达变化不一样,脊髓损伤对于脊髓头端和尾端的干细胞存活影响不一致,头端的存活高峰在第3天,尾端则在第7天,并且治疗组Nestin+存活的数量大于对照组的时间,头端在第3天,尾端在第14天;而分化为星形胶质细胞趋势,头端和尾端却是一致的,分化的高峰都在第7天,并且此时损伤尾端治疗组Nestin+/GFAP+大于对照组;在损伤后第14天,治疗组头端NeuN+细胞个数大于对照组,且差异有统计学意义。结论:半横断损伤后大鼠后肢功能恢复先慢于Allen’s法损伤,在损伤后第2周恢复速度快于Allen’s法损伤,并且在第二周恢复的速度明显快于第一周。超短波能够减少脊髓损伤早期坏死面积、提高大鼠运动功能评分,有利于损伤后3天和14天神经干细胞的存活,但是损伤头端和尾端表现不尽相同。并且超短波治疗也能够减少损伤后7天神经干细胞分化为星形胶质细胞的数量。
【图文】：

3 结果结果显示，Allen’s 法的大鼠在损伤后后肢运动功能评分恢复速度较平均，而半横断损伤后大鼠后肢功能在前 5 天恢复较慢，都低于挫伤组，但是 5 天后恢复速度加快，在第 7 天的时候超过了挫伤组，并且在第 14 天半横断损伤组评分高于挫伤组，，且差异有统计学意义（p<0.05）。表 3.1 每个时间点的 BBB 评分Group 1d 3d 5d 7d 14d半横断损伤 0±0 0.53±0.66 1.00±1.50 5.80±1.89 10.90±2.98aAllen’s 法损伤 0±0 0.75±0.78 2.14±1.12 3.92±1.75 5.83±0.96aa：两组损伤模型对照 p<0.05 ； n=7

脊髓横断切片观察位置定义
【学位授予单位】：中国医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R651.2;R-332

【参考文献】

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本文编号：2589690