阪崎克罗诺杆菌脂多糖的致病作用及脆弱拟杆菌的干预探究

发布时间：2020-04-07 05:17

【摘要】：阪崎克罗诺杆菌(Cronoabcter sakazakii)是一种较易引发新生儿、早产儿及免疫力低下者败血症、脑膜炎、小肠结肠炎等疾病的致病菌,且致死率高达80%,目前尚未找到确切性的致病机制,而有关LPS在阪崎克罗诺杆菌中的致病作用及其脆弱拟杆菌的干预研究报道较少。本课题通过提取阪崎克罗诺杆菌LPS腹腔注射SD幼鼠造模,取粪便提取DNA通过测序检测肠道菌群的变化;取小肠、结肠做石蜡切片显微镜下观察组织损伤程度;取血清用ELISA试剂盒检测血清中前炎性因子TNF-α、IL-1β、IL-6的含量表达、抗炎性因子IL-10及血清中NO的表达;取小肠提RNA做荧光定量检测小肠紧密连接蛋白及Toll样受体TLR4、一氧化氮合酶i NOS的含量表达。结果表明阪崎克罗诺杆菌LPS可以引发肠道菌群紊乱,影响炎性因子的表达,整体上来看炎性因子先升高最后逐渐降低,除此之外,还影响了肠道紧密连接蛋白(Claudin-4,Occludin)、TLR4以及i NOS的表达,使肠道组织受到不同程度损伤。益生菌对于肠性疾病的治疗有着显著作用,而脆弱拟杆菌的益生作用报道较少,所以开展脆弱拟杆菌NCTC 9343对阪崎克罗诺杆菌LPS致病的干预研究。本实验分别在注射阪崎克罗诺杆菌LPS之前5天灌胃脆弱拟杆菌和注射阪崎克罗诺杆菌脂多糖之后5天灌胃脆弱拟杆菌,然后取大肠粪便、小肠、结肠、血清,分别从菌群、组织切片、细胞炎性因子、基因和蛋白水平上进行探究,结果表明脆弱拟杆菌NCTC 9343预防组和治疗组都能够有效改善肠道菌群结构,使感染阪崎克罗诺杆菌LPS组的SD大鼠肠道菌群结构恢复接近正常组老鼠肠道菌群水平,同时两个实验组都能够降低炎性因子水平,对于紧密连接蛋白、TLR4、i NOS的表达都具有显著调节作用。本论文为阪崎克罗诺杆菌脂多糖致病的分子机制提供了重要的基础数据,对有效预防和控制该菌感染具有重要意义。
【图文】：

图 1.1 LPS 致病机制通路图（作者自绘）Fig1.1 The pathogenesis pathway of LPS当 LPS 侵入机体后，首先被 LBP 识别，LBP 可加快 LPS 的解聚，然后与 结合并将之运送至免疫细胞膜表面与 CD14结合，形成 LPS-LBP- CD14三联[43]。随后将 LPS 转运至 TLR4-MD-2 蛋白复合体处，，在 MD-2 的帮助下与 T，激活 TLR4。TLR4 被激活之后导致其膜内构像发生改变，并将此种信号免疫细胞内部，继而活化核转录因子 NF-кB 和丝裂原活化蛋白激酶（MAP

图 1.2 益生菌与肠道上皮屏障作用机制示意图[65].2 Schematic diagram of mechanism between probiotics and intestinal epithelial barrier[65] 益生脆弱拟杆菌的研究益生菌是对人体健康有益的活菌，摄入适量益生菌能够改善肠道菌群的平衡预防和治疗肠道性疾病有着重要作用[66,67]，例如腹泻、炎症性肠病等。益生在于平时我们所食用的食物上，它对于我们的身体有益，食用足够量的益生以增加机体免疫力来对抗病原菌。益生菌的在此方面所起到的益生作用比较，总体可以分为两种：一种是菌体自身以及其活性代谢产物对有害物质的直用，这种作用可通过粘附或者降解有害物质达到；第二种是通过对肠道菌群节及对代谢酶的调控间接对其进行免疫调节作用，使机体中有益和有害微生到生态平衡。 目前，较为常见的益生菌是乳酸菌和双歧杆菌[68]，而有关益生拟杆菌的研究极少。所以开展益生脆弱拟杆菌的研究意义重大。脆弱拟杆菌是一种革兰氏阴性杆菌，属于一种专性厌氧菌。最开始脆弱拟杆从致病部位分离得到的[69]，所以被认为是对人体有害的细菌，随着对其更加
【学位授予单位】：合肥工业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R378

【参考文献】

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1 张晓音;吴e

本文编号：2617497