阿司匹林丁香酚酯干预动脉粥样硬化和预防血栓的作用及其基于组学的机制

发布时间：2020-04-20 07:18

【摘要】：本研究利用金黄地鼠动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)模型,采用代谢组学技术手段,探讨阿司匹林丁香酚酯(Aspirin eugenol ester,AEE)对AS形成的干预作用;利用角叉菜胶大鼠血栓模型,结合蛋白质组学技术,挖掘AEE预防血栓形成的潜在作用机制,同时区别AEE、阿司匹林(Acetyl salicylic acid,ASA)和丁香酚(Eugenol,Eug)作用方式的差异。1、在金黄地鼠AS模型中,主动脉弓具有典型的AS病变,同时伴有肝脏病理损伤及生化指标紊乱。AEE不仅能够显著改善肝细胞的病变,调节血脂紊乱,而且可以减少泡沫细胞数量,抑制主动脉弓壁增厚,改善血管狭窄,表明AEE对AS有一定的改善效果。2、金黄地鼠血浆和尿液代谢组学分析结果表明,对照组、模型组和AEE组代谢轮廓区分明显。AEE对血浆和尿液中的代谢差异物具有很好的调节作用,其可能主要通过干预氨基酸代谢、能量代谢、泛酸和CoA代谢、核黄素代谢和甘油磷脂代谢等发挥抗动脉粥样硬化的作用。3、金黄地鼠肝脏和粪便代谢组学结果表明,对照组、模型组和AEE组的肝脏和粪便的代谢轮廓存在显著差别。在肝脏和粪便中共挑选出28个差异代谢物,且AEE能够逆转高脂饲料对部分代谢物的影响。代谢通路分析结果表明,这些代谢物主要涉及氨基酸代谢、谷胱甘肽代谢、能量代谢和甘油磷脂代谢等,AEE可能通过对这些代谢通路的调节发挥对动脉粥样硬化的抑制作用。4、在大鼠血栓模型中,血浆蛋白质组学结果表明,角叉菜胶可显著影响血凝、血小板激活等相关蛋白质的组成和表达,诱导能量代谢障碍和系统性炎症。AEE主要通过调节TCA循环相关蛋白的表达,改善能量代谢损伤来抑制血栓形成。ASA对谷氨酸脱氢酶具有显著的下调作用,可能对能量代谢及肝细胞保护等发挥一定作用。Eug主要抑制纤维蛋白原及凝血调控相关蛋白的表达,抑制血小板和凝血因子的激活。平行反应监测(Parallel reaction monitoring,PRM)验证结果表明,AEE、ASA和Eug对筛选血浆蛋白均有一定的调节作用,但其调节强度存在差别。5、在大鼠血栓模型中,肝脏蛋白质组学结果表明,角叉菜胶可能通过影响补体与凝血级联反应、氧化应激、脂肪酸代谢、钙离子通道调节、花生四烯酸代谢等诱导大鼠血栓形成。AEE可显著降低补体和凝血级联反应中相关肝脏蛋白的表达、抑制血小板激活以及调节HIF-1、MAPK等信号通路。ASA对肝脏蛋白的作用主要为影响血红蛋白复合体相关蛋白的表达、胆固醇代谢及FoXo信号通路。Eug显著调节肝脏中补体和凝血级联反应和低氧应激相关蛋白的表达,同时对钙离子通道和氨基酸代谢有一定调节作用。PRM结果进一步验证了AEE、ASA和Eug对筛选肝脏蛋白的调节作用,同时也说明AEE、ASA和Eug对肝脏蛋白的作用方式及调节强度存在差别。
【图文】：

角叉菜胶诱导的大鼠尾部血栓模型

工作流程图,试剂,工作流程,基本原理

6图 1.3 iTRAQ 试剂工作流程(Keshishian et al, 2017Fig. 1.3 Workflow of the iTRAQ reagent图 1.4 SRM 和 PRM 监测的基本原理(张伟, 2014)Fig. 1.4 The principle of SRM and PRM.
【学位授予单位】：中国农业科学院
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R543.5;R-332

【参考文献】