使用结扎法建立大鼠经脉不通病理模型及其对代谢影响的观察

发布时间：2020-06-24 18:56

【摘要】：[目的]气血失常是脏腑经络病候的病机之一,而经脉不通是导致气血失常的重要病理变化。目前成熟的经脉不通动物模型及对其研究均较少。本研究以经脉的低流阻组织液通道学说为基础,采用结扎法建立大鼠经脉不通病理模型,并通过对模型大鼠的饮食摄入量及大小便量的测量,观察该模型对大鼠代谢的影响,以评估模型的有效性。希冀为今后的经络研究提供有效的实验动物模型。[方法]1.实验一使用结扎法建立大鼠经脉不通病理模型:将48只雄性SD大鼠随机分为4组,每组12只。先测量任脉低电阻线(简称任脉线),结扎1组在任脉线上结扎1个点;结扎2组在任脉线上结扎2个点;结扎3组在任脉线上结扎3个点,结扎4组在任脉线外结扎1个点。结扎点宽度1cm,结扎点间隔1-2mm。使用组织液压波传播法分别测量各组结扎前后任脉线的组织液压波传播幅度并比较变化。2.实验二大鼠经脉不通病理模型对代谢的影响:实验分批进行,共选用雄性SD大鼠27只,分为空白对照组(对照组)、胃经不通组(胃经组)和肾经不通组(肾经组),每组9只。使用结扎法分别阻断胃经组的胃经低电阻线和肾经组的肾经低电阻线,对照组只做麻醉处理。分别观察造模前一周和造模后第六周的连续三天的每日尿量、粪便湿重、烘干后的粪便干重、饮水量和进食量,并计算粪便含水量。3.实验三大鼠在动物监测系统与普通鼠笼中代谢状态的比较:在实验二最后一批的6只大鼠的研究中,分别观察空白对照组(2只)、胃经不通组(2只)和肾经不通组(2只)三组大鼠在普通鼠笼(50cm×33cm×20cm)和代谢监测笼(32cm×20cm×18cm)中连续三天的饮水量和进食量变化。[结果]1.实验一:4个结扎组结扎前后组织液压波的变化率依次分别为8.17%、-7.83%、-13.27%、-52.80%,其中结扎4组、结扎1组和结扎2组结扎后与结扎前比无显著性差异(P0.05),但三组的变化率由正变负,逐渐负向增加,结扎3组结扎后的组织液压波传播幅度与结扎前比显著减小,差异有统计学意义(P0.01);结扎8周后解剖观察,结扎部位皮肤与肌肉紧密粘连。2.实验二:2.1尿量:空白对照组大鼠造模后第六周的尿量比造模前一周增加28.12%(P0.05);胃经不通组大鼠造模后第六周的尿量比造模前一周增加59.28%(P0.05);肾经不通组大鼠造模后第六周的尿量比造模前一周增加41.33%(P0.05)。造模前一周与造模后第六周的尿量变化率组间比较均无统计学意义(P0.05)。2.2粪便含水量:空白对照组、胃经不通组与肾经不通组大鼠的粪便含水量,造模前一周的均值分别为44.71%、40.87%、43.39%,造模后第六周的均值分别为43.88%、40.26%、42.27%,三组变化均无统计学意义(P0.05)。造模前一周与造模后第六周的粪便含水量变化率组间比较均无统计学意义(P0.05)。2.3饮水量:空白对照组大鼠造模后第六周的饮水量比造模前一周减少12.99%(P0.05);胃经不通组大鼠造模后第六周的饮水量比造模前一周减少2.71%(P0.05);肾经不通组大鼠造模后第六周的饮水量比造模前一周减少8.58%(P0.05)。造模前一周与造模后第六周的饮水量变化率组间比较均无统计学意义(P0.05)。2.4进食量:空白对照组大鼠造模后第六周的进食量比造模前一周增加 5.64%(P0.05);胃经不通组大鼠造模后第六周的进食量比造模前一周减少2.02%(P0.05);肾经不通组大鼠造模后第六周的进食量比造模前一周减少2.03%(P0.05)。造模前一周与造模后第六周的进食量变化率组间比较均无统计学意义(P0.05)。3.实验三:在连续观察中,造模后的大鼠由普通鼠笼放入代谢监测笼后饮水量骤减,甚至少于造模前一周低周龄时期的尿量,进食量也略有减少;造模后的大鼠在代谢监测笼中的饮水量和进食量均较少,而在放回普通鼠笼后饮水量和进食量骤然增加。[结论]1.采用结扎法成功建立了大鼠经脉不通的病理模型,并用组织液压波传播法证明了该模型的可靠性和稳定性,使经络不通的病理造模可在最常用的实验动物大鼠上进行,为未来的针灸经络研究奠定了新的模式生物基础。2.造模后第六周,空白对照组和胃经不通组尿量显著增加,胃经不通组的尿量又比空白对照组高出1倍以上,而肾经不通组的尿量没有显著增加;空白对照组饮水量减少、进食量增加,而胃经不通组和肾经不通组饮水量减少较少、进食量增加较少。说明结扎阻断胃经经脉可导致大鼠尿量增加明显,有出现阳明腑实证的趋势,说明结扎胃经对胃经相关脏腑代谢造成影响的趋势;结扎阻断肾经经脉可对大鼠水液代谢造成影响,表现为尿量未明显增加,说明结扎阻断肾经经脉可能对肾经相关脏腑代谢造成影响。3.因代谢监测笼体积较小,可能对大鼠的代谢产生一定影响,造成其饮水量和进食量下降,提示今后大鼠代谢的研究应在较大的笼具中进行。
【学位授予单位】：北京中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R-332;R228
【图文】：

示意图,经脉,大鼠,任脉

１．７组织液压波的测量逡逑在腹部任脉线上选取长４－５ｃｍ的一段作为测量区，分别将近心端和远心端标记为Ａ逡逑点和Ｂ点，如图３所示。用测量组织液波压传播法［１２１测量任脉线的组织液压波传播。具逡逑体操作如下：碘伏局部消毒后，使用生物流阻／组织液压测量仪，将由带侧孔６号注射器逡逑针头制作的测试针头向心方向由Ｂ点插入大鼠任脉皮下，使侧孔位于距Ｂ点ｌｃｍ处的逡逑任脉线皮下（在测试针头上距侧孔ｌｃｍ处用记号笔进行标记后，由Ｂ点插入大鼠皮下逡逑至标记处，即可使侧孔位于Ｂ点ｌｃｍ处），用安固特胶将针头固定于皮肤上并放置于升逡逑降台上，使测试针头保持水平状态，该针头用于测量组织液压波的传播；用２ｍｌ注射器逡逑由与任脉垂直方向从Ａ点旁开ｌｃｍ处插入皮下至Ａ点（在注射器针头上距针尖ｌｃｍ处逡逑用记号笔标记后，从Ａ点旁开ｌｃｍ处插入皮下至标记处，即可使注射器针尖位于Ａ点），逡逑在Ａ点注入生理盐水形成人工丘泡。从注射器迅速注入０．１ｍｌ的生理盐水到任脉组织中，逡逑形成一个小丘泡

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再进行任脉线的组织液压波传播幅度的测量，然后再采用各组结扎方法。具体方法如下：逡逑用缝合针（规格０１／２邋５ｘ１２）穿过进针点皮肤，穿过其皮下肌肉，从出针点穿出，用４逡逑号丝线将所选部位皮肤与其皮下肌肉紧密结扎在一起，结扎宽度为ｌｃｍ（图４），结扎完逡逑成后减去多余丝线。逡逑图４大鼠结扎后的即刻解剖观察逡逑—结扎处丝线逡逑１．９结扎后组织液压波的测量逡逑各组结扎完成后，再次用同样的方法测得结扎后任脉线的组织液压力传播幅度。逡逑１．１０指标计算方法逡逑分别计算结扎前施加压力后和施加权力前的液压差的绝对值、结扎后施加力后和逡逑施加压力前的液压差的绝对值，取两者平均值，得出各组在结扎前后的压力幅度并计算逡逑２９逡逑

【参考文献】