Ac-SDKP对肺纤维化小鼠模型肺泡上皮细胞凋亡影响的研究

发布时间：2020-07-15 12:56

【摘要】：目的:利用博来霉素诱导的C57BL/6小鼠肺纤维化模型,研究Ac-SDKP对特发性肺间质纤维化(IPF)病程中肺泡上皮细胞凋亡的影响,探讨相关的作用机制。方法:选择健康雄性C57BL/6小鼠24只(体重为25±2g),将小鼠随机分为3组,其分组方法按照随机数字表法进行,分组情况:对照组(N组,n=8只)、肺纤维化模型组(B组,n=8只)、Ac-SDKP干预组(H组,n=8只)。B组及H组的小鼠气管内滴注博来霉素(按5 mg/kg,溶于0.9%生理盐水共配制成50μl混合溶液)制备肺纤维化模型;造模14天后于小鼠腹腔内埋入Ac-SDKP药物微量释放泵,H组微量泵内含Ac-SDKP混合溶液(Ac-SDKP 800 ug.kg~(-1).d~(-1),冰乙酸0.1 M,卡托普利100mg.kg~(-1).d~(-1)),B组为不含Ac-SDKP的上述混合溶液,持续干预14天。N组小鼠处理方法同B组,气管内滴注与博来霉素等体积(50μl)的0.9%氯化钠生理盐水。在给予气管内给药后第28天处死小鼠取肺组织。取右肺福尔马林溶液固定后制片,通过HE染色和Masson染色,观察肺纤维化病理变化程度,免疫组化法检测GRP78、CHOP、Bax、AIF蛋白的表达情况,TUNEL法检测小鼠肺组织细胞凋亡。取左肺组织液氮速冻,用碱水解法检测肺组织中羟脯氨酸(HYP)含量,荧光RT-PCR检测AIF、caspase 3的m RNA表达。结果:模型组肺组织纤维化病变明显,Ac-SDKP的干预可减轻肺纤维化。干预组CHOP、GRP78、AIF蛋白及Bax蛋白表达与模型组比较表达少(P0.05)。干预组因子AIF、caspase3的mRNA表达较模型组有所下调,差异有统计学意义(P0.05)。干预组与模型组小鼠肺组织细胞亡指数较对照组均增高明显,其中模型组高于干预组,3组间差异有统计学意义(P0.05)。结论:Ac-SDKP可通过影响内质网应激-线粒体凋亡途径减少特发性肺间质纤维化肺泡上皮细胞凋亡。
【学位授予单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R563;R-332

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本文编号：2756518