养心安神法调控失眠模型大鼠CREB信号通路的机制研究

发布时间：2020-08-13 01:57

【摘要】：目的:查阅相关文献,从中医角度认识心的结构和功能、神的分类和功能以及心与神之间的关系,从病因、病机、治法、方药等角度理清中医对失眠的认识,探讨心神与睡眠的关系,以及养心安神法治疗失眠的理论基础。构建失眠大鼠模型,观察养心安神法对失眠大鼠的作用及脑部相关神经因子及其受体的影响。通过理论探讨和实验研究两部分为养心安神法在失眠中的应用提供理论基础和实验依据。方法:1.理论探讨:查阅资料,整理文献,理清中医对心以及神的系统性认识,把心、神、睡眠三者之间的关系进行归纳总结,明晰心神对睡眠的影响,从中医的角度探讨养心安神法的作用,并整理相关的治则治法、处方用药。2.实验研究:选取SPF级SD雄性大鼠50只,运用复合造模法(水环境法+腹腔注射咖啡因、环磷酰胺)构建失眠大鼠模型,观察该条件下各个指标的变化情况。每一组大鼠分别灌胃给药14d,借助Morris水迷宫法检测其学习记忆能力,应用自发活动实验视频分析系统观察各组的自主活动;下丘脑的超微病理结构借助透射电镜,具体观察SCN形态、细胞器等;通过免疫组化比较各组之间神经因子在海马、下丘脑的阳性表达;ELISA试剂盒对大鼠下丘脑、海马中NGF、BDNF和VIP的表达进行检测;Real Time-PCR法检测其下丘脑、海马NGF、BDNF、VIP受体表达的影响。结果:1.一般状态:造模前(T=0,T=7),各组大鼠精神活跃,活动良好,睡眠规律,皮毛光泽。造模开始阶段,部分大鼠出现过度兴奋,毛发晦暗枯藁,爪甲白色或淡黄色;到造模后期时(T=21,T=28),造模大鼠兴奋性降低,精神萎靡,多数大鼠双目无神,口唇、爪甲颜色发白,毛发杂乱,反应迟钝。空白组自始至终状态良好,活动灵活,睡眠、摄食如常。体重称量:造模期间空白组体重增长明显,其余组均有一定的增长。未造模时以及适应性喂养1周(T=0,T=7),造模组与空白组对照无差异性(P0.05),造模7d后(T7),空、模两组体重差异凸显(P0.01),造模后期(T=21,T=28),各组体重均低于空白组,有显著差异(P0.01),此时造模各组体重增长放缓,趋于平稳。外周血红蛋白浓度:造模的前7天,各组比较显示Hb浓度无明显差异(P0.05),从造模第7天后检测发现各造模组较空白组血红蛋白浓度降低(P0.01),在第21d、第28d时中药组和西药组与模型组比较,外周血红蛋白浓度有所升高,但仍明显低于空白组(P0.05)。2.Morris水迷宫:在平台潜伏期、游泳总路程的对比上,模型组较空白组明显X棾

本文编号：2791351