mTORC1对微管稳定性的影响及意义

发布时间：2020-10-22 08:52

　　 目的:mTOR(mechanistic target of Rapamycin)是一类在真核生物中高度保守的非典型丝氨酸/苏氨酸激酶,细胞内主要存在mTORC1和mTORC2两种复合体。mTOR参与众多细胞生物学过程。在低等生物酵母细胞中,mTOR具有调控细胞骨架的功能,但在哺乳动物细胞中它是否能够调控细胞骨架一直存在争议。本课题旨在探讨mTORC1对细胞骨架之一的微管系统(microtubule)的稳定性的影响以及雷帕霉素(Rapamycin)与微管靶点化疗药物联用对微管系统的调控。方法:1.采用免疫荧光技术,观察雷帕霉素预处理组和未处理组细胞对微管解聚药物诺考达唑的抵抗能力,从而评估微管的稳定性。2.采用蛋白免疫印迹技术,检测经雷帕霉素处理后,微管靶点化疗药物诱导肿瘤细胞凋亡的能力。3.采用shRNA技术和Crispr-Cas9技术构建ATG5缺陷细胞系。4.采用免疫荧光技术,观察ATG5正常组和缺陷组细胞对诺考达唑的抵抗能力。5.采用蛋白免疫印迹技术,检测mTORC1不同活化程度下,Stathmin、KIF2A、CLIP-170等微管相关蛋白的表达变化。结果:1.在雷帕霉素预处理过的HeLa细胞中,诺考达唑解聚微管的能力相比于对照组明显降低。2.使用雷帕霉素稳定微管后,紫杉醇与诺考达唑诱导肿瘤细胞凋亡能力降低,而对照组依托泊苷诱导肿瘤凋亡能力并没有降低。3.在ATG5敲低和敲除的细胞中,诺考达唑解聚细胞微管结构的能力与对照组相比并无太大差异。结论:1.雷帕霉素能够增强微管的稳定性,mTORC1负性调控微管稳定性。2.雷帕霉素稳定微管可以抑制微管靶向化疗药物的肿瘤细胞的杀伤作用。3.雷帕霉素稳定微管的能力与细胞自噬无关。细胞自噬的发生需要稳定的微管,但是微管的稳定不需要细胞自噬的参与。
【学位单位】：江苏大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R363
【部分图文】：

mTORC1和mTORC2的组成

图 1.2 mTOR 信号通路[29]Figure1.2 mTOR signaling pathway..1.2 mTOR 通路与肿瘤近年来的研究表明，mTOR 在肿瘤疾病的发生和进展中扮演着重要的作用瘤细胞中比较重要的细胞活动，如转移、增殖、分化都受到 mTOR 通路的调节大量的肿瘤中都已检测到 mTOR 的高度活化，如胰腺癌[30]、胃癌[31]、乳腺癌[32巢癌[33]等。在许多细胞系的体外实验和老鼠模型的体内实验中，致癌基因的活化或者抑癌基因的丢失促进了肿瘤的生长、血管生成和转移[34]。众多研究，mTORC1 的高度活化缩短了细胞周期，加速了 G1/S 期的进展，使得肿瘤细殖能力增强[35]；高度活化的 mTORC1 可以活化低氧诱导因子α(HIF-α)，促进管内皮生长因子（VEGF）的转录和表达，导致新生血管形成为肿瘤增加额外

ton）是一种细胞的重要的机械核生物的细胞中，细胞骨架主由微丝（micro filaments）、微）组成，这三种蛋白质纤维拥扮演着不同的角色[54]。另一种55, 56],这种蛋白质能够连接细胞还能将细胞的化学能转化为机的三种骨架蛋白之一，分布于胞骨架蛋白中，微管的形态结
【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 李娇;许卓;赵洋;蔡广研;张利;陈香美;;mTORC1在慢性肾功能不全胰岛素抵抗中的作用[J];现代生物医学进展;2017年12期

2 段志远;;泛素化在mTORC1信号通路中的研究进展[J];生物化工;2017年04期

3 李娇;许卓;赵洋;王旭;蔡广研;张利;陈香美;;mTORC1在慢性肾脏病胰岛素抵抗中的变化[J];中国中西医结合肾病杂志;2017年06期

4 刘淼;张月;何敏红;周玲;郑航;;mTORC1信号通路在花生四烯酸代谢产物致乳腺癌过程中的作用[J];山东医药;2014年14期

5 申俊华;朱伟云;;GCN2和mTORC1信号路径对动物机体氨基酸平衡的调节作用[J];畜牧兽医学报;2017年09期

6 张婧婧;张楠;吴伟;王鹏;杨景瑞;段巨洪;于海川;;mTORC1信号促进前成骨细胞MC3T3-E1的分化成熟[J];中国免疫学杂志;2016年11期

7 赵涛;乐静;李传静;刘爱林;;mTORC1相关蛋白在胃肠胰神经内分泌肿瘤中的表达及其与预后的相关性[J];实用癌症杂志;2017年11期

8 安文蓉;徐云生;黄延芹;;mTORC1在糖尿病致病机理探析[J];中华中医药学刊;2019年01期

9 杨剑;许红霞;;氨基酸感应对mTORC1的调节作用及其与肿瘤的关系[J];肿瘤代谢与营养电子杂志;2017年02期

10 谢双德;魏姗姗;张华年;王桂松;彭学标;赵珂;李俊灏;赖宽;;mTORC1信号通路在狼疮鼠体内的表达及意义[J];中国麻风皮肤病杂志;2018年08期

相关博士学位论文 前10条

1 李红武;mTORC1负调控COX2在结节性硬化症中的作用及机制研究[D];安徽医科大学;2016年

2 鲍文蕾;mTORC1在鞭毛蛋白诱导炎性细胞因子表达中的调控作用与机制[D];内蒙古大学;2015年

3 尼玛青格乐;mTORC1在金黄色葡萄球菌及其肽聚糖诱导炎性反应中的作用与机制[D];内蒙古大学;2015年

4 陈献威;小鼠胚胎成纤维细胞mTORC1调控蛋白的鉴定及功能研究[D];中国科学院北京基因组研究所;2016年

5 刘璐;基于mTORC1信号通路研究益气凉血生肌方对内皮细胞损伤修复的干预机制[D];北京中医药大学;2018年

6 罗毅;抑制体外扩增小鼠造血干细胞衰老维持干性：下调异常激活的mTORC1信号[D];华中科技大学;2011年

7 潘浩;胡椒碱通过调控mTORC1信号增强巨噬细胞固有免疫功能的机制研究[D];暨南大学;2017年

8 李巧新;mTORC1相关基因功能性多态位点与前列腺癌易感性及预后关系的分子流行病学研究[D];复旦大学;2014年

9 万伟;mTORC1调控乙酰转移酶p300活性的机制及功能研究[D];浙江大学;2017年

10 邓露;RNF152通过介导RagA GTPase的泛素化修饰对mTORC1活性进行负调控[D];华东师范大学;2017年

相关硕士学位论文 前10条

1 季佩宇;mTORC1对微管稳定性的影响及意义[D];江苏大学;2018年

2 何敏红;mTORC1信号通路参与炎症性肠病的发生发展[D];南方医科大学;2015年

3 毛志敏;雷公藤多苷调控mTORC1信号通路活性改善糖尿病肾病足细胞损伤的作用和机制[D];南京中医药大学;2016年

4 白亚丹;人巨细胞病毒pUL38激活mTORC1的机制研究[D];苏州大学;2015年

5 刘淼;n-3多不饱和脂肪酸抑制mTORC1与结直肠癌发生[D];南方医科大学;2014年

6 刘颖春;mTORC1基因多态性与肝细胞癌遗传易感性的关联研究[D];广西医科大学;2014年

7 郑丽萍;Raptor介导小豆蔻明抑制氨基酸激活mTORC1的研究[D];福建医科大学;2017年

8 宋娇;葡萄糖和氨基酸通过mTORC1信号通路影响小鼠皮肤成纤维细胞生长[D];重庆医科大学;2013年

9 王小开;靶向mTORC1与mTORC2信号抑制骨肉瘤的实验研究[D];南方医科大学;2012年

10 陈国荣;不同载荷机械牵伸通过mTORC1信号通路调节肌腱异位骨化[D];南方医科大学;2016年

本文编号：2851379