AdeB基因变异介导鲍曼不动杆菌多药耐药

发布时间：2020-11-03 05:47

　　 采用纸片扩散法(K-B法)测定鲍曼不动杆菌(AB)菌株对临床常用9大类22种抗生素的耐药性,应用PCR检测耐药基因,将耐药基因adeB转化至敏感菌株AB43中,荧光定量PCR检测AdeB mRNA的转录,药敏试验检测转化后菌株的耐药性变化。结果表明:收集的68株AB对亚胺培南和美罗培南耐药率分别高达51.47%和50.00%。耐药基因adeR、adeS、adeA、adeB、adeC、OXA-23、OXA-51、TEM-1、VIM-1在碳青霉烯类耐药、中介及敏感株中的分布差异不大;adeB基因在耐药株和敏感株中的序列存在较大差异,二者同源区也存在3个氨基酸残基的变异;耐药菌株来源的adeB基因在敏感菌株中表达后可导致AB的耐药性显著增强。这一研究提示AdeB基因变异可导致AB多药耐药性显著增加。
【部分图文】：

2.1 AB耐药菌株中存在多种耐药基因将68株AB进行耐药基因的PCR筛查, 图1为 AB1菌株的筛查结果, 其余菌株扩增结果略。68株AB中筛查到adeR基因的有62株, adeS有1株, adeA有58株, adeB有63株, adeC有60株, TEM-1有41株, OXA-23有61株, OXA-51有65株, VIM-1没有发现。

2.4 RadeB导致AB的多药耐药将RadeB和SadeB分别与原核表达载体pET-GFP连接, 并将重组载体分别转入敏感株AB43中。荧光定量PCR检测AB43、AB43∷SadeB、AB24和AB43∷RadeB菌株中adeB转录的mRNA(图2)。AB43∷SadeB重组株与AB43野生株相比, SadeB基因mRNA转录量明显升高,差异极显著(P=0.000 5<0.001)。而AB43∷RadeB重组株与RadeB来源的AB24野生株相比, RadeB基因mRNA转录量基本不变(P=0.21>0.05)。但9大类22种临床常用抗生素的药敏试验结果(表3)表明, 与敏感的野生株AB43相比, AB43∷SadeB重组株仍然敏感, 而AB43∷RadeB重组株却变异为对除米诺环素、氨苄西林/舒巴坦、多黏菌素B、加替沙星外的18种抗生素均耐药。
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