肺炎克雷伯菌转录调控子RcsAB对galF基因调控研究

发布时间：2020-11-05 13:45

　　 目的 探究肺炎克雷伯菌转录调控子RcsAB对荚膜多糖表型的影响及对荚膜多糖相关基因galF的调控机制。方法 将肺炎克雷伯菌NTUH-K2044的野生株与rcsA、rcsB、rcsAB的敲除株和回补株进行毒力实验和荚膜多糖相关表型实验。采用细胞毒性实验,荚膜多糖定量实验以及荚膜多糖电镜观察,探究rcsA、rcsB基因对肺炎克雷伯菌的荚膜多糖的影响。同时从分子水平验证转录调控子RcsAB可能通过调控荚膜多糖相关基因galF来影响荚膜多糖形成,qRT-PCR分析调控是上调或下调,并运用EMSA和DNaseI足迹实验验证结合的基序,全面阐述RcsAB对gal F基因的调控。结果 荚膜多糖相关实验结果显示Rcs AB转录调控子正调控荚膜多糖的功能,且细胞毒性实验显示RcsAB调控子影响菌株毒力形成。qRT-PCR结果显示RcsAB正调控galF基因的转录,EMSA结果说明galF基因不单独与RcsA、RcsB结合,而是与RcsAB蛋白复合物结合,通过DNaseI足迹实验显示RcsAB蛋白复合物能直接结合到galF基因启动子区-177bp至-155bp之间的序列上。结论 RcsAB蛋白复合物通过直接调控荚膜多糖相关基因galF正调控荚膜多糖的形成,从而影响菌株的毒力。
【学位单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R378
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1 Herwig Cerwenka;;Pyogenic liver abscess: Differences in etiology and treatment in Southeast Asia and Central Europe[J];World Journal of Gastroenterology;2010年20期

本文编号：2871716