不同性别PyMT自发性乳腺癌小鼠成瘤特点和不同时间肺转移观察

发布时间：2020-11-07 17:02

　　 [目的]研究不同性别自发性乳腺癌小鼠乳腺肿瘤病毒启动子(mouse mammary tumor virus, MMTV)控制下表达多瘤中间T抗原(polyoma middle T-antigen, Py MT)的转基因小鼠的致瘤特性,再以雌性小鼠为观察对象进一步研究血常规指标变化及肺转移情况等。[方法]准备同为8周龄的Py MT雌性小鼠和Py MT雄性小鼠,观察比较雌性与雄性小鼠肿瘤发病时间、生存时间与生存率;另取同为8周龄的雌性Py MT和雌性FVB小鼠,观察8周后取血进行血常规检测,并通过病理切片观察小鼠12周龄及16周龄时肺组织的病理变化。[结果]每周观测小鼠的形态学特征可发现雌鼠第8周可扪及肿瘤,而雄鼠则在第18周可扪及肿瘤;雌鼠最长生存时间是19周,雄鼠则为46周,即雌性小鼠肿瘤发病时间早于雄性小鼠,生存时间明显短于雄性小鼠。血常规指标检测显示,雌性Py MT小鼠白细胞及亚群(除单核外)数量明显高于FVB小鼠(P0.05,P0.001);雌性Py MT小鼠在12周龄开始出现肺转移,肺部大量炎症细胞浸润,16周时肺组织伊红染色法(hematoxylin-eosin staining,HE)染色发现明显的肺转移,出现弥漫性分布、大小不等、质实、染色深的癌巢,细胞间推挤或重叠,细胞大小形态不同。[结论] MMTV-PyMT自发性乳腺癌小鼠雌鼠发病比雄鼠早,生存时间短,具有实验周期短、便于观察肿瘤发生的优势,12周龄开始出现肺转移,16周龄肺转移明显,是适合用于筛选抑制肿瘤细胞浸润、转移等药物的乳腺癌动物模型。本实验还通过血常规结果、肺转移情况数据为实验动物性别的选择提供参考。
【部分图文】：

∈螅???、3、4、5、6、7、8和10无条带，为MMTV-PyMT阴性小鼠即FVB小鼠。2.2雌性与雄性鼠肿瘤生长趋势比较如图2B、2D中所示，乳腺癌MMTV-PyMT转基因小鼠无论雌雄均会自发性出现肿瘤。雌性小鼠组在第8周出现可扪及的肿瘤，雄性组则在第18周出现可扪及的肿瘤，雌性小鼠出现肿瘤时间远早于雄性小鼠，且雌性小鼠模型组肿瘤发展速度较雄性鼠快。随着时间的推移，肿瘤的体积逐渐增大，数目增多。如图2A、2C所示，两组体重均呈现稳定增长的趋势。2.3雌性与雄性鼠生存率及生存时间比较如图3注：M,markerNote:M,marker图1MMTV-PyMT转基因小鼠基因型鉴定图Fig.1GenotypicidentificationofMMTV-PyMTmice500200100M12345678910图2乳腺癌MMTV-PyMT小鼠肿瘤生长情况与体重变化Fig.2ChangesoftumorgrowthandbodyweightofMMTV-PyMTmice雌性体重Weight(g)AB50403020Volume(mm3)20000150001000050000雌性瘤体积8910111213141589101112131415WEEKSWEEKS雄性体重Weight(g)C45403530251820222426283032WEEKS1820222426283032WEEKSDVolume(mm3)1000080006000400020000雌性瘤体积1209

0软件进行统计分析，两样本间采用t检验，以P<0.05表示差异具有统计学意义，P<0.001表示差异具有高度统计学意义。2结果2.1MMTV-PyMT转基因小鼠基因型鉴定图经聚合酶链式反应（polymerasechainreaction,PCR）扩增后，加入2μL6×loadingbuffer，混匀，上样10μL于1.5%琼脂糖凝胶上样孔中，电泳30min后，结果如图1中所示，MMTV-PyMT阳性小鼠基因检测条带为556bp，由此推断样本2、4和9均为MMTV-PyMT阳性小鼠，样本1、3、4、5、6、7、8和10无条带，为MMTV-PyMT阴性小鼠即FVB小鼠。2.2雌性与雄性鼠肿瘤生长趋势比较如图2B、2D中所示，乳腺癌MMTV-PyMT转基因小鼠无论雌雄均会自发性出现肿瘤。雌性小鼠组在第8周出现可扪及的肿瘤，雄性组则在第18周出现可扪及的肿瘤，雌性小鼠出现肿瘤时间远早于雄性小鼠，且雌性小鼠模型组肿瘤发展速度较雄性鼠快。随着时间的推移，肿瘤的体积逐渐增大，数目增多。如图2A、2C所示，两组体重均呈现稳定增长的趋势。2.3雌性与雄性鼠生存率及生存时间比较如图3注：M,markerNote:M,marker图1MMTV-PyMT转基因小鼠基因型鉴定图Fig.1GenotypicidentificationofMMTV-PyMTmice500200100M12345678910图2乳腺癌MMTV-PyMT小鼠肿瘤生长情况与体重变化Fig.2ChangesoftumorgrowthandbodyweightofMMTV-PyMTmice雌性体重Weight(g)AB50403020Volume(mm3)20000150001000050000雌性瘤体积8910111213141589101112131415WEEKSWEEKS雄性体重Weight(g)C45403530251820222426283032WEEKS1820222426283032WEEKSDVolume(mm3)1000080006000400020000雌性瘤体积1209

?啤?如图6所示，肺HE染色结果显示PyMT小鼠12周龄时肺泡结构部分被破坏，肺组织中大量炎症细胞浸润，气管璧增厚，某些小鼠开始出现肺转移。PyMT小鼠16周龄时肺组织出现严重的肺转移，出现弥漫性分布，大小不等、质实、染色深的癌巢，呈非典型增生，导管受压变窄，细胞间推挤或重叠，细胞大小形态不同，偶尔可见核分裂现象；肿瘤细胞排列紊乱，失去正常的结构和层次，胞核增大，核分裂增多。3讨论在小鼠乳腺癌病毒（mousemammarytumorvirus,郎佳丽，等：不同性别PyMT自发性乳腺癌小鼠成瘤特点和不同时间肺转移观察图3雌性与雄性鼠生存时间比较Fig.3Comparisonofsurvivaltimebetweenfemaleandmalemice雌性生存曲线100806040200SurvivalRtae(%)A151617181920WEEKS雄性生存曲线100806040200SurvivalRtae(%)B3840424446WEEKS注：与FVB小鼠比较，*P<0.05，***P<0.001Note:ComparedwiththeFVBmice，*P<0.05，***P<0.001图4雌性MMTV-PyMT与FVB小鼠血常规指标比较Fig.4ComparisonofbloodroutineindexesbetweenMMTV-PyMTandFVBoffemalemiceWBC2520151050A10∧9/LNEUT20151050B10∧9/LLYMPH86420C10∧9/LMONO0.250.200.150.100.050.00D10∧9/LEOS0.40.30.20.10.0E10∧9/LBASO0.080.060.040.020.00F10∧9/LLUC1.00.80.60.40.20.0F10∧9/LFVBPYTM1210
【参考文献】

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【共引文献】

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【二级参考文献】

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本文编号：2874231