研究背景:原发性痛经,又称功能性痛经,是指经妇科检查,生殖器官无器质性改变的痛经。其发病率每年都在增加,不利于女性的身体及心理健康。原发性痛经的发病机制较为复杂,主要与体内前列腺素、血管加压素、催产素、β-内啡肽、雌二醇、孕酮、钙离子、镁离子、神经与神经递质、内皮素和一氧化氮等因素有关。目前比较公认的发生机制是体内前列腺素E2(PGE2)、前列腺素F2α(PGF2α)含量的改变。西医治疗以口服非留体抗炎药为主,但存在不良反应多,远期治疗效果不理想的问题。除此之外,还有口服避孕药、钙离子通路阻滞剂、维生素、经皮神经电刺激、心理治疗、有氧运动等方式,对于缓解原发性痛经有一定作用,但远期疗效有限。而手术疗法主要运用在口服西药没有效果的反复发作的痛经,不是常用手段。西医学中的原发性痛经归属于中医“经行腹痛”的范围,其病机可总结为“不通则痛”和“不荣则痛”。中医疗法对原发性痛经有显著的疗效,中药、针灸、按摩、穴位埋线、穴位贴敷等治法均已取得不同程度的疗效。其中振腹推拿是以腹部为主要施术部位,以“松振法”为基本手法,以“振腹”为主要操作形式的脏腑推拿疗法,具有调整阴阳、培补元气、温阳散寒等功效,用以治疗原发性痛经效果甚佳。但是振腹推拿治疗原发性痛经的机制尚未阐明,我们将通过本次实验对此进行深入研究。研究目的:本研究通过建立原发性痛经大鼠模型,采用酶联免疫吸附测定、免疫组化等检测方法,与模型组、阳性药物组对照,对振腹推拿治疗大鼠原发性痛经的疗效进行评价,同时观测振腹推拿对于原发性痛经模型大鼠的PGF2α、PGE2及PGF2α受体(PTGFR)活性改变的生物学效应,基于PGE2、PGF2 α及PTGFR水平探讨振腹推拿对原发性痛经的作用机制。研究方法:8周龄健康雌性SD大鼠40只,接受一星期适应性饲养后,实行阴道细胞涂片法确定雌鼠动情周期。根据细胞形态、种类及数量评价动情周期10天,筛选动情周期规律的雌鼠继续阴道涂片,选择处于动情间期的雌鼠开始造模。将筛选出的32只老鼠,按照随机数字法分成4组,包括空白组、模型组、阳性药物组、推拿组,每组各8只。苯甲酸雌二醇、缩宫素联合使用以制备原发性痛经大鼠模型。模型组、阳性药物组、推拿组将苯甲酸雌二醇注射于腹部皮下,第1,10天剂量为0.5mg/只,第2-9天为0.2 mg/只,连续10d。第10天四组老鼠分别腹腔注射缩宫素2U/只,观察并记录扭体反应。成模后,阳性药物组予以塞来昔布30mg/kg/d灌胃治疗,持续10d。推拿组采取振腹推拿治疗,15min/只,每日一次,连续10d。观测指标:大鼠一般行为和扭体反应;大鼠血清及子宫组织中PGE2、PGF2α含量;子宫内膜上PTGFR水平;子宫形态学改变。研究结果:1.与空白组相比,原发性痛经模型大鼠毛发暗淡萎黄,动作行为变缓慢,新陈代谢速度减慢,精神状态弱。而经过西药治疗和振腹推拿治疗后,这些症状得到改善。2.与空白组比较,其余三组大鼠扭体潜伏时间变短,扭体次数变多,有显著差异(P0.01),提示原发性痛经大鼠模型制备成功。阳性药物组与推拿组的扭体潜伏时间较模型组明显延长,扭体次数明显减少,均具有统计学差异(P0.05)。3.与空白组相比,模型组老鼠血清中PGF2 α和PGE2水平较之具有统计学差异(P0.05)。与模型组相比,阳性药物组及推拿组血清PGF2α水平均降低,推拿组血清PGE2含量增高,有统计学意义(P0.05)。4.与空白组比较,其余三组子宫组织中PGF2 α含量均升高,模型组及阳性药物组子宫组织中PGE2水平都下降,具有统计学意义(P0.05)。与模型组相比,阳性药物组及推拿组PGF2 α含量均降低,推拿组PGE2水平提高,组间有统计学意义(P0.05)。并且就子宫组织PGE2水平而言,推拿组较阳性药物组升高(P0.05)。5.模型组的PTGFR表达较空白组显著增加(P0.01);与模型组相比,阳性药物组和推拿组PTGFR表达减弱,组间有统计学意义(P0.05)。结论:1.振腹推拿可以明显改善原发性痛经模型大鼠的一般状况,增加扭体潜伏时间,缩减扭体次数,改善痛经症状。2.振腹推拿可以降低血清及子宫组织中PGF2 α含量,升高PGE2含量,进而抑制子宫平滑肌收缩,促进子宫平滑肌松弛,缓解痛经。3.振腹推拿可以抑制PTGFR在子宫内膜上的表达,减少其与PGF2 α的结合,缓解子宫平滑肌痉挛性收缩,发挥治疗痛经的作用。综上所述,我们认为振腹推拿对原发性痛经效果显著,其作用机制是降低PGF2 α在血清及子宫组织中的水平,升高PGE2水平,抑制PTGFR在子宫内膜上的表达,缓解子宫平滑肌收缩,治疗原发性痛经。
【学位单位】：北京中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R244.1;R-332
【部分图文】：
但总体数量较少；动情间期白细胞占极大范围的视野，细胞形态较小，偶见极??少量的有核上皮细胞和角化上皮细胞。本实验过程中观察到典型的四个周期阴道涂片??如图１所示：??、ｖ?ｃ?：?＾?／ｐｉ?＃??动情前期?动情期??，?？?、？－?ｖ?．ｎ十二：??？？?ｒ?，?？?？??霉?ｒ?．?＊｝?？?？?，?，螬．，？??＇．１：?－?＇＇４：广ｖ??动情后期?动情间期??图１．典型的动情周期阴道涂片（美蓝染色ｘ２００倍）??２．?２．?２实验分组??２７??
与空白组相比，模型组大鼠子宫内膜上ＰＴＧＦＲ表达水显著升高（Ｐ＜０．?０１）。与模??型组对比，阳性药物组和推拿组的表达水平下降，具有统计学意义（Ｐ＜０．?０５）。推拿??组阳性表达水平较阳性药物组升高，但组间无明显差异（Ｐ＞〇．?０５）。（见表６、图３）。??表６．各组大鼠子宫内膜ＰＴＧＦＲ的表达水平??组别?Ｎ?ＰＴＧＦＲ??空白组?８?０．０８０＋０．００３??模型组?８?０．?１１７＋０．?００６＊??阳性药物组?８?０．?１０１＋０．?００４？＊??推拿组?８?０．?１０２＋０．００４＊＊ｖ??注：与空白组相比，７＜〇．?０５；与模型组比较，？ＰｃＯ．ＯＳ；与阳性药物组比较，＊Ｐ＞０．?０５??．＇麵＿議??空白组?模型组??３３??
振腹推拿对原发性痛经模型大鼠子宫ＰＧＥ２、Ｆ＞ＧＦ２ａ及其受体表达的影响??空白组?８?８?０?０?０?０?４．５模型组?８?０?０?２?２?４?２２．３阳性药物组?８?０?１?１?４?２?１９．推拿组?８?０?０?３?３?２?１９．：与空白组比较，＂Ｐ＜０．０１??
【参考文献】
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本文编号：
2894294
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