去乙酰基化酶SIRT6在脂肪细胞和肝星状细胞中的作用及机制研究

发布时间：2020-12-03 11:01

　　背景在肥胖和2型糖尿病等代谢性疾病中,糖、脂代谢发生紊乱,在肝脏、脂肪和骨骼肌等组织中会出现糖酵解和脂质合成异常。脂肪和肝脏是人重要的代谢器官,是机体代谢平衡的重要组成部分。代谢性疾病可以引起肝组织损伤,肝代偿性修复异常调节后导致肝纤维化（liver fibrosis）。哺乳动物Sirtuin家族中的一个重要成员,Sirtuin6（SIRT6）,参与调控了包括代谢,炎症、衰老等许多重要生理功能。它在脂肪组织代谢平衡和肝脏疾病发生发展过程中的作用还不是很清楚。目的本研究拟使用广泛应用于基因敲出的Cre-loxp系统建立两种SIRT6基因在脂肪细胞中敲除的小鼠模型,研究SIRT6在脂肪细胞中的功能;利用肝星状细胞的细胞系-LX2细胞以及SIRT6过表达（全身性）的转基因小鼠（TgSIRT6）为研究对象,研究SIRT6在肝星状细胞中的的作用。方法1.研究SIRT6在脂肪细胞中的作用（1）利用正常饲料和60%高脂饲料喂养野生型小鼠（wild-type,WT）,建立肥胖小鼠模型,通过Western blot检测SIRT6在脂肪组织中的表达。（2）利用SIRT6 floxed(Sirt6^... 

【文章来源】：新乡医学院河南省

【文章页数】：74 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

SIRT6FKO小鼠和对照小鼠BAT组织中，UCP1，PGC1α和PPARγ热基因的表达（n=3只/组）

42理 LX2 细胞降低 SIRT6 的表达。（A）10ng/mL 的 TGFβ1 处理 LX2 mRNA 水平；（B）10ng/mL 的 TGFβ1 处理 LX2 细胞 24 h，Wester表达以及 H3K9，H3K56 的乙酰基化水平。数据表示均数±平均标准误 Western blotting 检测腺病毒 SIRT6 和腺病毒 shSIRT6 在 L（knockdown）SIRT6 的效率和 Western blotting 结果显示（图 2-1，A 和 B）：腺病毒 SIRT

SIRT6 的敲低都导致纤维化相关基因的表达上升（图2-2，B）。图 2-2：LX2 细胞中 SIRT6 对纤维化相关基因的调控。（A）SIRT6 和对照 GFP 的腺病毒感染 LX2细胞 24 h 后，不使用或者使用 10ng/mL 的 TGFβ1 再诱导 24 h，纤维化相关基因的表达；（B）shSIRT6 和对照 shGFP 的腺病毒感染 LX2 细胞 24 h 后，不使用或者使用 10ng/mL 的 TGFβ1 再诱导 24 h，纤维化相关基因的表达。数据表示均数±平均标准误差（S.E.M）。*P< 0.05。AB

【参考文献】：
期刊论文
[1]Cellular and molecular mechanisms in the pathogenesis of liver fibrosis:An update[J]. Gülsüm ?zlem Elpek.  World Journal of Gastroenterology. 2014(23)



本文编号：2896304