弓形虫来源的exosomes通过JNK信号通路激发促炎性免疫应答的机制研究

发布时间：2020-12-03 17:03

　　研究背景:外泌体（exosomes）是由细胞内的多囊泡体与细胞膜相融合,从而释放到细胞外的双层膜性纳米小囊泡。exosomes能够在细胞间传递生物活性物质,发挥重要的细胞间信息交流的作用。目前已有相关研究报道,原虫可以分泌exosomes,且在宿主与寄生虫间的信息交流方面发挥着重要作用。迄今,一些寄生虫,如日本血吸虫、布氏锥虫、克氏锥虫和新孢子虫,均被证实可以分泌exosomes。弓形虫是一种专性细胞内寄生的机会性致病原虫,具有生活史复杂且感染率高等特点,严重危害着人们的健康与畜牧业的发展。因此,探索有效预防或治疗手段来抵抗弓形虫感染刻不容缓。目前关于弓形虫来源的exosomes的相关研究仍较为有限。研究目的:分离、纯化和鉴定弓形虫ME49虫株来源的exosomes,并对弓形虫exosomes中非编码RNA进行分析,预测相关miRNA的宿主靶基因和靶定信号通路。进一步探究MAPK信号通路在弓形虫exosomes对宿主免疫应答的调控机制中的作用。研究方法:首先利用差速离心、超滤浓缩以及试剂盒提取相结合的方法,对弓形虫exosomes进行分离提取。并通过电子显微镜、纳米粒径分析仪（NTA）... 

【文章来源】：山东大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：68 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１弓形虫生活史７??Ｆｉｇ．ｌ?Ｔｈｅ?ｌｉｆｅ?ｃｙｃｌｅ?ｏｆ?Ｔ．?ｇｏｎｄｉｉ??

应激活化蛋白激酶／ｃ－Ｊｕｎ氨基末端激酶（ＳＡＰＫ／ＪＮＫ）和ｐ３８ＭＡＰＫ，这类蛋白??激酶与细胞功能的许多改变具有一定功能相关性，包括细胞因子表达、增殖和凋??亡。ＪＮＫｓ和ｐ３８ＭＡＰＫｓ?（如图３）作为应激活化蛋白激酶通路，在促炎性反应??及维持组织稳态中发挥关键性作用。它们通过环境因素和遗传因素来调控增殖、??分化以及细胞的存活４１。因此，作为免疫及促炎反应的活化调控关键因子，ＭＡＰＫｓ??在促炎性细胞因子的产生中具有重要调控作用４２。?＇??在我们前期的研究中，我们发现弓形虫可以通过分泌ｅｘｏｓｏｍｅｓ调节宿主的??免疫应答４３。因此，在本研究中，我们将进一步在体外实验中研究弓形虫ｅｘｏｓｏｍｅｓ??对巨噬细胞ＲＡＷ２６４．７的作用。我们的研究结果表明，弓形虫来源的ｅｘｏｓｏｍｅｓ??可通过激活ＪＮＫ信号通路引起固有免疫应答，从而为宿主－寄生虫的信息交流提??供重要调节因子。??１１??

弓形虫速殖子形态结构显微观察??我们通过光学显微镜对弓形虫ＭＥ４９虫株速殖子进行形态观察。结果如图５??示，可见弓形虫形态成经典的月牙形，形态饱满，有利于后期弓形虫ｅｘｏｓｏｍｅｓ??提取。??


本文编号：2896442