沙眼衣原体CT849蛋白激活JNK/ERK信号通路诱导THP-1细胞分泌促炎细胞因子

发布时间：2020-12-07 05:39

　　目的:探讨沙眼衣原体（Chlamydia trachomatis,Ct）CT849蛋白在宿主细胞炎症调节过程中起到的作用及有关机制,为进一步了解Ct致病情况提供可靠的、准确的数据支持。方法:CT849蛋白的表达与鉴定,从STD基因数据库查获ct849全基因序列进行优化密码子合成获取ct849基因序列,构建p GEX-4T-1/ct849重组载体,测序鉴定;将重组载体p GEX-4T-1/ct849转化至E.coli BL21（DE3）内诱导表达,采用纯化、去内毒素及BCA法检测CT849蛋白浓度;用多粘菌素B去除CT849蛋白内毒素后,先用PMA预处理THP-1细胞24h,再用浓度为0μg/ml、1.25μg/ml、2.5μg/ml、5μg/ml、10μg/ml的CT849蛋白分别刺激预处理的THP-1细胞24h,采用ELISA检测随CT849蛋白浓度的增加,TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-8促炎细胞因子表达水平的变化;选择浓度为10μg/ml的CT849蛋白在0h、6h、12h、24h和36h刺激THP-1细胞,采用ELISA检测随时间不同CT849蛋白对THP-1细胞产生T... 

【文章来源】：南华大学湖南省

【文章页数】：73 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
英文缩略语索引
第1章 前言
第2章 实验材料
    2.1 主要的实验仪器
    2.2 菌株和细胞
    2.3 试剂盒
    2.4 主要实验试剂
    2.5 其他
第3章 实验方法
    3.1 CT849蛋白在大肠杆菌中密码子优化后的表达
    3.2 CT849蛋白的去内毒素处理
    3.3 THP-1细胞培养和模型建立
    3.4 ELISA检测促炎细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-8表达水平
    3.5 Westernblot检测
第4章 实验结果
    4.1 CT849重组蛋白的诱导表达与鉴定
    4.2 CT849蛋白诱导THP-1细胞分泌促炎细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-8
    4.3 CT849蛋白促进THP-1细胞ERK和JNK磷酸化
第5章 讨论
第6章 结论
参考文献
文献综述
    参考文献
附录
攻读学位期间的科研成果
本研究受以下基金资助
致谢



本文编号：2902732