小鼠胚胎Pde4d的表达调控及其影响细胞增殖和迁移的研究

发布时间：2020-12-07 13:34

　　Pde4d基因位于小鼠13号染色体，该基因的编码产物是磷酸二酯酶超家族（Phosphodiesterase，PDE）成员之一。因其专一性水解细胞内的环腺苷酸（cAMP），可在cAMP/CREB和cAMP/EPAC细胞信号通路中发挥重要的作用。有研究指出，Pde4d是一个父本偏好的基因，并对遗传疾病和肿瘤发生有重要的影响，但是此研究中的SNP位点不能准确反映Pde4d的印记特点，且该基因与胚胎发育的关系并不十分清楚。因此，本文通过PCR产物直接测序法对Pde4d基因座在发育中的印记特点进行分析；通过了解Pde4d在胚胎发育中的表达模式与调控特点，揭示其在胚胎发育中的潜在功能；并以骨髓间充质干细胞MS-K为研究模型，探讨PDE4D对MS-K细胞增殖和迁移的影响，旨在揭示该基因可能在胚胎发育中具有的作用。本研究为明确Pde4d在小鼠胚胎发育中的印记特点，首先利用生物信息学对Pde4d基因座进行分析。研究发现，Pde4d印记报道中的SNP位于内含子中的转录单元-AK046832内部，表明AK046832具有父本表达偏好的印记特点。同时分析发现，基因座内部存在两个CpG岛（CGI1和CGI2）在... 

【文章来源】：哈尔滨工业大学黑龙江省 211工程院校 985工程院校

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【学位级别】：博士

【部分图文】：

PDE4D长、短亚型结构图

哈尔滨工业大学工学博士学位论文化谱，分析发现两个 CpG 岛在小鼠精子和卵母细胞间均存在差异甲基化，在卵母细胞显示出更高的甲基化水平（图 3-2b，2c），而在受精卵中则呈现了与卵母细胞截然相反的甲基化状态，且在后期的发育过程中逐渐发生了去甲基化，特别是在成体脑中呈现了超低甲基化水平。这些结果表明，两个岛的甲基化状态在小鼠发育过程中经历了较大的动态变化。因为具有调控作用的 CpG 的甲基化状态通常决定基因印记状态的改变，故这两个 CpG 岛可能会对 Pde4d 及其基因座内转录单元的印记方式产生影响。

第 3 章 Pde4d 基因座的印记特点中基因组范围内逐渐升高的甲基化状态是不同的。特别是在成脑中两个 CpG 岛呈现出了超低甲基化水平。这一结果一方面暗示，CGI1 和 CGI2 甲基化的显著变化可能是引起基因座内转录单元印记与转录发生变化的潜在因素之一。另一方面暗示，这两个岛内的甲基化水平的变化可能与小鼠早期胚胎发育和成脑发育调控存在联系。a)


本文编号：2903347