E3泛素连接酶MARCH8调控冠状病毒S蛋白降解的机制研究

发布时间：2020-12-16 04:05

　　冠状病毒是一类能够引起人类呼吸道感染的重要病原体,其感染可导致严重肺炎,甚至危及生命,目前还没有有效药物可以治疗。冠状病毒基因组可以编码16个非结构蛋白,其中非结构蛋白3（non-structuralprotein3,nsp3）是最大的一个组分,包含多个功能性结构域。其中,冠状病毒的木瓜样蛋白酶（papain-likeprotease,PLpro）是nsp3中一个重要的结构域,它具有去泛素化酶活性和去ISG化活性,而它的去泛素化底物以及识别底物的机制仍然不完全清楚。蛋白质的泛素化修饰是细胞中一种重要的翻译后修饰,参与调节细胞内许多生理活动,因此病毒在进化过程中也演变得与泛素化修饰密不可分,一方面病毒可以利用泛素化促进自身复制,另一方面宿主可以利用此通路抑制病毒复制。泛素化修饰在生物进化过程中非常保守,涉及到一系列的酶参与反应,包括E1泛素激活酶、E2泛素结合酶以及E3泛素连接酶,而其中泛素化修饰的特异性主要由E3泛素连接酶来决定。膜相关RING-CH（Membrane-associated RING-CH,MARCH）蛋白是近年来才被发现的一类RING结构域家族成员。目前有研究发现MA... 

【文章来源】：北京协和医学院北京市 211工程院校 985工程院校

【文章页数】：58 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图５．冠状病毒Ｓ蛋白区域示意图??１２??

图７是本研究??的技术路线图

ＳＡＲＳ－ＣｏＶ、ＭＥＲＳ－ＣｏＶ和ＭＨＶ?Ｓ蛋白在细胞中表达以及包装到慢病毒颗粒情况??的影响，并通过荧光素酶报告系统进一步确定ＭＡＲＣＨ８蛋白对Ｓ蛋白介导的慢病??毒颗粒转导效率的影响。从图９可以看出，在过表达ＭＡＲＣＨ８蛋白时，我们发现??ＭＡＲＣＨ８蛋白明显抑制了?ＳＡＲＳ－ＣｏＶ和ＭＥＲＳ－ＣｏＶ?Ｓ蛋白的表达，但是对ＭＨＶ?Ｓ??蛋白的表达基本上没有抑制作用。同样我们也发现在慢病毒包装细胞ＨＥＫ?２９３Ｔ中??过表达ＭＡＲＣＨ８蛋白时，抑制了?ＳＡＲＳ－ＣｏＶ、ＭＥＲＳ－ＣｏＶ?Ｓ蛋白包装进入慢病毒??颗粒中，而且携带ＳＡＲＳ－ＣｏＶ和ＭＥＲＳ－ＣｏＶ?Ｓ蛋白的慢病毒转导效率也被抑制了。??但是在过表达ＭＡＲＣＨ８蛋白时对ＭＨＶ?Ｓ蛋白包装进入慢病毒颗粒以及其慢病毒转??导效率几乎没有抑制作用。这些结果说明在过表达ＭＡＲＣＨ８蛋白时，很可能通过??降解ＳＡＲＳ－ＣｏＶ、ＭＥＲＳ－ＣｏＶ?Ｓ蛋白从而来抑制冠状病毒的进入，但是ＭＡＲＣＨ８??蛋白的表达对于ＭＨＶ?Ｓ蛋白基本上没有影响。??２９??


本文编号：2919500