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转录因子SNAI1在小鼠植入前胚合子型基因组激活中的作用研究

发布时间:2021-01-12 06:53
  研究目的:通过观察SNAI1在小鼠植入前胚中表达及SNAI1特异性抗体培养的结果,为阐明转录因子SNAI1在小鼠植入前胚合子基因组激活中的作用和机制提供理论依据。基本研究内容:1.观察SNAI1在小鼠1-细胞胚和2-细胞胚中的阶段性表达情况。2.观察SNAI1特异性抗体培养对小鼠植入前胚体外发育、合子型基因组激活(Zygotic genome activation,ZGA)、2-细胞胚DNA复制、2-细胞胚G1/S期过渡相关因子的影响。研究方法:1.SNAI1在小鼠1-细胞胚和2-细胞胚中的阶段性表达:于hCG注射后18h55h每隔一段时间收集KM小鼠不同细胞周期的1-细胞胚和2-细胞胚,利用细胞免疫荧光染色检测SNAI1蛋白的表达情况;2.SNAI1特异性抗体对小鼠植入前胚体外发育的影响:收集KM小鼠1-细胞胚,分别置于KSOM培养液,含不同浓度SNAI1特异性抗体、兔IgG的KSOM培养液中培养,观察小鼠植入前胚体外发育情况;3.SNAI1特异性抗体对小鼠ZGA的影响:收集KM小鼠1-细胞胚,分别置于含兔IgG(1μg/ml)和SNAI1特异性抗体(1μg/m... 

【文章来源】:福建医科大学福建省

【文章页数】:53 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

转录因子SNAI1在小鼠植入前胚合子型基因组激活中的作用研究


SNAI1蛋白在小鼠1-细胞胚和2-细胞胚的表达定位A,小鼠1-细胞胚选取G1,S,G2,有丝分裂期(hCG后19h、24h、27h、30h)观察SNAI1蛋白表达情况;B,小鼠2-细胞胚选取G1,S,G2,有丝分裂期(hCG后33h、Merged

KM小鼠,小鼠,细胞发育,培养液


23图 2: SNAI1 特异抗体对 KM 小鼠 1-细胞胚体外发育的影响。收集 KM 小鼠 1-细胞胚,置于 KSOM 培养液(空白对照)、1.0μg/ml 兔 IgG、和不同浓度(0.1μg/ml、0.5μg/ml、1.0μg/ml)SNAI1 抗体中培养,于 hCG 注射后 45h、66h、90h、120h 观察细胞发育率,并拍照。Bar=50μm。Figure 2: Effect of SNAI1 specific antibody on the development of 1-cell embryos in vitro.KM mouse 1-cell embryos were collected and cultured in KSOM medium, 1.0 μg/ml rabbitIgG, and SNAI1 antibody at different concentrations (0.1 μg/ml, 0.5 μg/ml, 1.0 μg/ml). Thedevelopment rate of the cells was counted at 45 h, 66 h, 90 h, and 120 h post-hCG. Bar=50μm.

KM小鼠,特异性,基数,统计学意义


embryosembryos(%)embryos(%)(%)(%)KSOM 105 105(100.00) 103(98.10) 103(98.10) 98(93.gG1.0μg/ml 102 100(98.04) 97(95.10) 96(94.12) 94(92.I1 特异性 0.1μg/ml103 101(98.06) 100(97.09) 99(96.12) 92(89.I1 特异性 0.5μg/ml102 99(97.06) 92(90.20)* 80(80.39)* 2(1.96I1 特异性 1.0μg/ml104 103(99.04) 0(0.00)* 0(0.00)* 0(0.00以 1-细胞胚为基数进行卡方(χ2)检验。“*”表示差异具有统计学意义(P<0.05)。Based on 1-cell embryo numbers and analyzed by χ2test. "*" indicates that the differencwas statistically significant (P < 0.05).

【参考文献】:
期刊论文
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[2]CDK6及E2F-1参与细胞周期调控pRb通路的研究进展[J]. 王瑞,达林泰,乌兰其其格.  现代肿瘤医学. 2015(03)
[3]小鼠植入前胚胎MuERV-L基因表达特征研究[J]. 邵根宝,高爱民,徐银学,丁红梅,贾超,刘红林.  南京农业大学学报. 2007(04)
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[5]细胞周期调控研究进展[J]. 张玉霞.  国外医学.遗传学分册. 2001(05)



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