转录因子SNAI1在小鼠植入前胚合子型基因组激活中的作用研究
发布时间:2021-01-12 06:53
研究目的:通过观察SNAI1在小鼠植入前胚中表达及SNAI1特异性抗体培养的结果,为阐明转录因子SNAI1在小鼠植入前胚合子基因组激活中的作用和机制提供理论依据。基本研究内容:1.观察SNAI1在小鼠1-细胞胚和2-细胞胚中的阶段性表达情况。2.观察SNAI1特异性抗体培养对小鼠植入前胚体外发育、合子型基因组激活(Zygotic genome activation,ZGA)、2-细胞胚DNA复制、2-细胞胚G1/S期过渡相关因子的影响。研究方法:1.SNAI1在小鼠1-细胞胚和2-细胞胚中的阶段性表达:于hCG注射后18h55h每隔一段时间收集KM小鼠不同细胞周期的1-细胞胚和2-细胞胚,利用细胞免疫荧光染色检测SNAI1蛋白的表达情况;2.SNAI1特异性抗体对小鼠植入前胚体外发育的影响:收集KM小鼠1-细胞胚,分别置于KSOM培养液,含不同浓度SNAI1特异性抗体、兔IgG的KSOM培养液中培养,观察小鼠植入前胚体外发育情况;3.SNAI1特异性抗体对小鼠ZGA的影响:收集KM小鼠1-细胞胚,分别置于含兔IgG(1μg/ml)和SNAI1特异性抗体(1μg/m...
【文章来源】:福建医科大学福建省
【文章页数】:53 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
SNAI1蛋白在小鼠1-细胞胚和2-细胞胚的表达定位A,小鼠1-细胞胚选取G1,S,G2,有丝分裂期(hCG后19h、24h、27h、30h)观察SNAI1蛋白表达情况;B,小鼠2-细胞胚选取G1,S,G2,有丝分裂期(hCG后33h、Merged
23图 2: SNAI1 特异抗体对 KM 小鼠 1-细胞胚体外发育的影响。收集 KM 小鼠 1-细胞胚,置于 KSOM 培养液(空白对照)、1.0μg/ml 兔 IgG、和不同浓度(0.1μg/ml、0.5μg/ml、1.0μg/ml)SNAI1 抗体中培养,于 hCG 注射后 45h、66h、90h、120h 观察细胞发育率,并拍照。Bar=50μm。Figure 2: Effect of SNAI1 specific antibody on the development of 1-cell embryos in vitro.KM mouse 1-cell embryos were collected and cultured in KSOM medium, 1.0 μg/ml rabbitIgG, and SNAI1 antibody at different concentrations (0.1 μg/ml, 0.5 μg/ml, 1.0 μg/ml). Thedevelopment rate of the cells was counted at 45 h, 66 h, 90 h, and 120 h post-hCG. Bar=50μm.
embryosembryos(%)embryos(%)(%)(%)KSOM 105 105(100.00) 103(98.10) 103(98.10) 98(93.gG1.0μg/ml 102 100(98.04) 97(95.10) 96(94.12) 94(92.I1 特异性 0.1μg/ml103 101(98.06) 100(97.09) 99(96.12) 92(89.I1 特异性 0.5μg/ml102 99(97.06) 92(90.20)* 80(80.39)* 2(1.96I1 特异性 1.0μg/ml104 103(99.04) 0(0.00)* 0(0.00)* 0(0.00以 1-细胞胚为基数进行卡方(χ2)检验。“*”表示差异具有统计学意义(P<0.05)。Based on 1-cell embryo numbers and analyzed by χ2test. "*" indicates that the differencwas statistically significant (P < 0.05).
【参考文献】:
期刊论文
[1]雌激素受体α抑制剂MPP对小鼠合子型基因组激活的影响可能与S期启动相关[J]. 许颂华,程霄翔,宋婵婵,贺琳,刘玥,连秀丽,逄丽丽,王世鄂. 中国组织化学与细胞化学杂志. 2015(06)
[2]CDK6及E2F-1参与细胞周期调控pRb通路的研究进展[J]. 王瑞,达林泰,乌兰其其格. 现代肿瘤医学. 2015(03)
[3]小鼠植入前胚胎MuERV-L基因表达特征研究[J]. 邵根宝,高爱民,徐银学,丁红梅,贾超,刘红林. 南京农业大学学报. 2007(04)
[4]Delay of ZGA initiation occurred in 2-cell blocked mouse embryos[J]. JIA JING QIU,WU WEN ZHANG,ZHI Li WU,YI HONG WANG,MIN QIAN,YI PING LIInstitute,of Biochemistry and Cell Biology,Shanghai Institutes for Biological Sciences. Chinese Academy of Sciences,200031 Shanghai,ChinaSchool of Life Science,East China Normal University. 200062 Shanghai,China. Cell Research. 2003(03)
[5]细胞周期调控研究进展[J]. 张玉霞. 国外医学.遗传学分册. 2001(05)
本文编号:2972377
【文章来源】:福建医科大学福建省
【文章页数】:53 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
SNAI1蛋白在小鼠1-细胞胚和2-细胞胚的表达定位A,小鼠1-细胞胚选取G1,S,G2,有丝分裂期(hCG后19h、24h、27h、30h)观察SNAI1蛋白表达情况;B,小鼠2-细胞胚选取G1,S,G2,有丝分裂期(hCG后33h、Merged
23图 2: SNAI1 特异抗体对 KM 小鼠 1-细胞胚体外发育的影响。收集 KM 小鼠 1-细胞胚,置于 KSOM 培养液(空白对照)、1.0μg/ml 兔 IgG、和不同浓度(0.1μg/ml、0.5μg/ml、1.0μg/ml)SNAI1 抗体中培养,于 hCG 注射后 45h、66h、90h、120h 观察细胞发育率,并拍照。Bar=50μm。Figure 2: Effect of SNAI1 specific antibody on the development of 1-cell embryos in vitro.KM mouse 1-cell embryos were collected and cultured in KSOM medium, 1.0 μg/ml rabbitIgG, and SNAI1 antibody at different concentrations (0.1 μg/ml, 0.5 μg/ml, 1.0 μg/ml). Thedevelopment rate of the cells was counted at 45 h, 66 h, 90 h, and 120 h post-hCG. Bar=50μm.
embryosembryos(%)embryos(%)(%)(%)KSOM 105 105(100.00) 103(98.10) 103(98.10) 98(93.gG1.0μg/ml 102 100(98.04) 97(95.10) 96(94.12) 94(92.I1 特异性 0.1μg/ml103 101(98.06) 100(97.09) 99(96.12) 92(89.I1 特异性 0.5μg/ml102 99(97.06) 92(90.20)* 80(80.39)* 2(1.96I1 特异性 1.0μg/ml104 103(99.04) 0(0.00)* 0(0.00)* 0(0.00以 1-细胞胚为基数进行卡方(χ2)检验。“*”表示差异具有统计学意义(P<0.05)。Based on 1-cell embryo numbers and analyzed by χ2test. "*" indicates that the differencwas statistically significant (P < 0.05).
【参考文献】:
期刊论文
[1]雌激素受体α抑制剂MPP对小鼠合子型基因组激活的影响可能与S期启动相关[J]. 许颂华,程霄翔,宋婵婵,贺琳,刘玥,连秀丽,逄丽丽,王世鄂. 中国组织化学与细胞化学杂志. 2015(06)
[2]CDK6及E2F-1参与细胞周期调控pRb通路的研究进展[J]. 王瑞,达林泰,乌兰其其格. 现代肿瘤医学. 2015(03)
[3]小鼠植入前胚胎MuERV-L基因表达特征研究[J]. 邵根宝,高爱民,徐银学,丁红梅,贾超,刘红林. 南京农业大学学报. 2007(04)
[4]Delay of ZGA initiation occurred in 2-cell blocked mouse embryos[J]. JIA JING QIU,WU WEN ZHANG,ZHI Li WU,YI HONG WANG,MIN QIAN,YI PING LIInstitute,of Biochemistry and Cell Biology,Shanghai Institutes for Biological Sciences. Chinese Academy of Sciences,200031 Shanghai,ChinaSchool of Life Science,East China Normal University. 200062 Shanghai,China. Cell Research. 2003(03)
[5]细胞周期调控研究进展[J]. 张玉霞. 国外医学.遗传学分册. 2001(05)
本文编号:2972377
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