腮腺炎减毒活疫苗病毒的抗肿瘤作用及机制研究

发布时间：2021-01-16 03:31

　　研究目的：以腮腺炎减毒活疫苗病毒作为溶瘤病毒,研究其对肿瘤的抑制效果,分析其抗肿瘤的作用机制,为肿瘤治疗探索新思路。研究方法：本文采用腮腺炎减毒活疫苗病毒（杭州市疾病控制中心）、小鼠胃癌细胞系（MFC）和人肾母细胞瘤细胞系（G401）开展研究。实验主要分为3组,分别是腮腺炎减毒活疫苗病毒原液组、腮腺炎病毒原液*10-1组（即病毒滴度为原液组的1/10）和无病毒的对照组。1.采用Vero细胞体外扩增病毒,收集腮腺炎减毒活疫苗病毒；利用空斑形成单位PFU法,测定病毒滴度。2.96孔细胞培养板内接种细胞,采用CCK-8检测腮腺炎减毒活疫苗病毒原液组对MFC、G401肿瘤细胞的抑制作用。3.通过FITC Annexin V/PI-流式细胞方法,在腮腺炎减毒活疫苗病毒诱导下,连续3天观察MFC、G401肿瘤细胞的凋亡率变化。4.获取腮腺炎减毒活疫苗病毒感染3天后的MFC、G401肿瘤细胞,提取DNA全基因,进行DNA电泳,明确DNA Ladder凋亡小体的形成。5.提取腮腺炎病毒感染3天后的MFC、G401肿瘤细胞蛋白,进行Western Blot蛋白电泳,检测自噬相关蛋白P62、LC3（LC3... 

【文章来源】：浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：69 页

【学位级别】：博士

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致谢
中文摘要
Abstract
英文缩写词与中英文索引
目录
引言
器材与试剂
    1、材料和试剂
    2、仪器设备
    3、试剂配制
实验方法
    1、细胞培养、传代、冻存和复苏
    2、腮腺炎减毒活疫苗病毒扩增、纯化及滴度检测
    3、CCK-8检测腮腺炎减毒活疫苗病毒对G401、MFC肿瘤细胞的抑制作用
    4、FITC ANNEXIN V/PI检测细胞凋亡率
    5、DNA提取,进行电泳DNA LADDER
    6、WESTERN BLOT蛋白电泳
    7、建立肿瘤动物模型与溶瘤治疗
    8、统计学方法
实验结果
    1、腮腺炎减毒活疫苗病毒PFU滴度检测
    2、腮腺炎减毒活疫苗病毒对肿瘤细胞的抑制作用
    3、肿瘤细胞感染腮腺炎减毒活疫苗病毒后的细胞学变化
    4、腮腺炎减毒活疫苗病毒诱导肿瘤细胞凋亡
    5、腮腺炎减毒活疫苗病毒诱导产生DNA LADDER
    6、腮腺炎减毒活疫苗病毒诱导肾母细胞瘤细胞自噬
    7、腮腺炎减毒活疫苗病毒对荷瘤鼠胃癌的治疗作用
讨论
结论
参考文献
综述
    参考文献
作者简介



本文编号：2980077