Epsin2基因沉默对小鼠内皮细胞体外血脑屏障模型的影响

发布时间：2021-01-22 17:30

　　目的:研究使用小干扰RNA（siRNA）特异性沉默体外血脑屏障模型中小鼠脑微血管内皮细胞系b. End3细胞中Epsin2的表达后对血脑屏障模型的功能及VEGFR2、ZO1、occludin表达的影响。方法:使用化学合成的siRNA特异性干扰b. End3细胞Epsin2的表达,免疫荧光、Western Blot检测转染后细胞Epsin2、VEGFR2、ZO1、occludin的表达。体外血脑屏障模型分为对照组（control）和Epsin2-siRNA干扰组（Epsin2-siRNA）,Control组使用正常b. End3细胞建立体外血脑屏障模型,Epsin2-siRNA组使用Epsin2-siRNA转染后b. End3细胞建立体外血脑屏障模型,分别于建模24、48、72 h后进行跨内皮电阻测定,48 h辣根过氧化物酶（HRP）渗透试验测定血脑屏障模型功能。结果:转染后b. End3细胞Epsin2免疫荧光和Western Bolt结果均提示表达下降（P <0. 05）。随着Epsin2的表达下降,VEGFR2表达随之下降,ZO1、occludin表达上升（P <0. ... 

【文章来源】：神经解剖学杂志. 2019,35(06)北大核心

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
材料和方法
    1 材料
        1.1 实验细胞
        1.2主要试剂及仪器
2 方法
    2.1 细胞培养
    2.2 siRNA转染
    2.3免疫荧光染色
    2.4 Western Blot
    2.5 建立体外血脑屏障模型
    2.6 HRP通透性试验测定BBBM通透性
    2.7 统计学分析
结果
    1 Epsin2-siRNA抑制b.End3细胞中Epsin2的表达
    2 Epsin2沉默对b.End3细胞中VEGFR2、ZO1和occludin的表达的影响
3 Epsin2沉默后TEER值测
    4 Epsin2沉默降低体外血脑屏障模型的HRP通透性
讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]大鼠脑微血管内皮细胞与周细胞、星形胶质细胞共培养建立体外血脑屏障模型[J]. 查雨锋,傅晓钟,张顺,罗敏,欧瑜,董永喜,王爱民,王永林.  中国药理学通报. 2015(05)
[2]血管内皮生长因子受体-2所介导信号通路的研究进展[J]. 康从民,王大伟,吕英涛,张媛媛.  生物化学与生物物理进展. 2009(10)



本文编号：2993630