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钟基因在不同胎龄小鼠胚胎和孕鼠的表达规律

发布时间:2021-02-11 05:10
  背景:胚胎发育过程中,周期性节律出现的时间和作用至今尚未完全研究清楚。目的:观察小鼠胚胎发育过程中钟基因在不同胎龄胚胎、孕鼠肝脏和骨骼肌的时空表达特点。方法:收集ICR小鼠胎龄10-17 d全胚胎,用抗CLOCK和抗Per1多克隆抗体对胎龄10-17 d小鼠胚胎心脏、肺、肝和体壁骨骼肌进行免疫组织化学染色;胎龄10-17 d小鼠胚胎、孕鼠肝脏和股四头肌的c DNA作模板,定量RT-PCR分析钟基因BMAL1、CLOCK、Per1和肌调节因子myogenin、Tcap、MAZ的表达规律。结果与结论:(1)小鼠胚胎发育早期,全胚的钟基因相对表达较低;(2)免疫组织化学显示胎龄10至11d,心脏未见CLOCK和Per1阳性细胞,孕鼠子宫蜕膜组织中可见略高于背景的CLOCK弱阳性细胞和Per1强阳性细胞;胎龄13 d,左心房底壁和左右支气管气道平滑肌清晰可见CLOCK阳性细胞;胎龄14 d,体壁骨骼肌出现CLOCK和Per1阳性细胞;胎龄15d始,全胚的钟基因表达明显升高,但未呈现周期性节律波动,Z线相关蛋白Tcap表达显著增高,提示肌节发育,肺叶内细支气管壁可见CLOCK阳性细胞,右心房出现... 

【文章来源】:中国组织工程研究. 2019,23(01)北大核心

【文章页数】:7 页

【文章目录】:
文章快速阅读:
文题释义:
0引言Introduction
1 材料和方法Materials and methods
    1.1 设计
    1.2 时间及地点
    1.3 材料
        1.3.1 实验动物
        1.3.2 实验用主要试剂和设备
    1.4 实验方法
        1.4.1 小鼠胚胎和孕鼠组织的收集
        1.4.2 总RNA的提取纯化和反转录
        1.4.3 定量聚合酶链式反应 (RT-qPCR) 分析
        1.4.4 免疫组织化学染色
        1.4.5 数据分析及形态学图像采集
    1.5 主要观察指标
2 结果Results
    2.1 钟基因BMAL1、CLOCK和Per1在不同胎龄小鼠胚胎的表达
    2.2 钟基因BMAL1、CLOCK和Per1在孕鼠外周器官肝脏和骨骼肌的表达
    2.3 肌调节因子myogenin在不同胎龄小鼠胚胎的表达
    2.4 小鼠胚胎发育过程中CLOCK和Per1在心脏、肺、肝和体壁骨骼肌的时空表达特点
3 讨论Discussion
    3.1 周期性节律的出现和细胞发育分化成熟相关
    3.2 钟基因在骨骼肌发育分化过程中的作用
    3.3 钟基因在心脏、肺和肝发育分化过程中的作用


【参考文献】:
期刊论文
[1]骨骼肌昼夜节律分子钟机制的研究进展[J]. 闫银弟,罗旭光,杨艳萍,李海荣,曹锡梅.  实用医学杂志. 2018(07)



本文编号:3028579

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