I-A d /IgG2b Fc二聚体融合蛋白的构建表达及鉴定

发布时间：2021-02-20 02:00

　　目的:构建I-A^d/IgG2b Fc杆状病毒表达载体,使其在Sf9昆虫细胞内表达。方法:利用RT-PCR从BALB/c小鼠淋巴细胞中扩增出I-A^dα、I-A^dβ和IgG2b Fc目的基因序列,运用重叠PCR将I-A^dα和I-A^dβ分别与Fos和Jun的亮氨酸拉链序列相连,形成I-A^dα-Fos和I-A^dβ-Jun;利用酶切位点XbaⅠ将I-A^dα-Fos与IgG2b Fc段相连,形成I-A^dα-Fos-IgG2b Fc重组序列;分别将I-A^dα-Fos-IgG2b Fc和I-A^dβ-Jun插入杆状病毒表达载体pFastBac^TMDual的P_PH和P_P10两个启动子的下游,构建出重组载体pFastBac^TMDual+[I-A^d/IgG2b F... 

【文章来源】：中国免疫学杂志. 2017,33(04)北大核心

【文章页数】：5 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
        1.1.1 质粒、菌株与细胞系
        1.1.2 试剂
    1.2 方法
        1.2.1 重组载体的构建
        1.2.2 重组载体的鉴定
        1.2.3 融合蛋白的表达、浓缩及检测
2 结果
    2.1 目的基因片段的获取
    2.2 I-Ad重组载体PCR及酶切鉴定
    2.3 融合蛋白的检测及鉴定
3 讨论



本文编号：3042051