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Islet-l促C 3 H 10 Tl/2向心肌样细胞特化中基因上组蛋白乙酰化作用及相互关系研究

发布时间:2021-03-03 15:34
  目的本课题组前期研究发现感染高表达Islet-1(Insulin geneenhancer binding protein-1,胰岛素增强结合因子)慢病毒载体的C3H10T1/2干细胞可被诱导向心肌样细胞特异性分化,心肌特异性蛋白基因Gata4,Nkx2.5,Mef2c表达增高。但Islet-1通过何种方式促使这些心肌特异性蛋白基因表达增高还不甚明了。本文将从表观遗传组蛋白乙酰化修饰的角度,来探讨Islet-1是否通过提高这些心肌特异性基因上组蛋白乙酰化的水平来促进其表达增加,以及心肌基因上组蛋白乙酰化水平的降低对与Islet-1的结合有无影响,最后综合分析明确Islet-1与心肌特异性基因上组蛋白乙酰化的相互关系。材料与方法用DMEM高糖培养基(含有10%胎牛血清)培养从液氮罐中复苏的C3H10T1/2细胞,5%的CO2,37℃孵箱中放置培育,C3H10T1/2细胞属于贴壁细胞,当细胞生长密度为80%左右时按1:3的比例及时传代。按Moi=20加入相对应量的病毒至细胞生长密度为60%的C3H10T1/2细胞,同时加入终浓度为8mg/L相对应量的Polybrene。就好的好的1.对细胞... 

【文章来源】:重庆医科大学重庆市

【文章页数】:75 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

Islet-l促C 3 H 10 Tl/2向心肌样细胞特化中基因上组蛋白乙酰化作用及相互关系研究


感染Islet-1后细胞形态的变化(x200)

荧光蛋白,慢病毒,实验组


图 1-1 C3H10 细胞感染 Islet-1 慢病毒后荧光蛋白表达(×200)A and B is empty infection the lentiviral C3H10 cell group of the same field fluorescentprotein and normal morphology were observed;C and D for the infection of Islet-1 lentiviral C3H10 cell group of the same field fluorescentprotein and normal morphology were observedFig1-1 Fluorescent protein expression in C3H10 cells of Islet-1 lentiviralinfection (× 200)A:C3H10 细胞组; B:阴性对照组; C:实验组

流式细胞计数,转染效率,慢病毒,快刀


哈A:空感染慢病毒C3H10细胞组感染效率 B 感染Islet-1慢病毒C3H10细胞组感染效率图1-3 流式细胞计数检测转染效率A:infection efficiency of C3H10 cells infected with Empty lentivirus groupB:Infection efficiency of C3H10 cells infected with Islet-1 lentiviral C3H10 cell groupFig1-3 Flow cytometry to detect the transfection efficiency哈斯电话机哦和吃成交额为和促进和可挖空间哦好吃吃砍价快刀此哦阿娇的哦BA


本文编号:3061511

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