19群肺炎链球菌国家标准菌株分子特征分析及在菌株质量控制中的应用

发布时间：2021-05-16 03:04

　　目的明确19群肺炎链球菌（Streptococcus pneumoniae）国家标准菌株的分子特征,为完善中国肺炎链球菌国家标准菌株的质量标准提供依据。方法在传统肺炎链球菌菌种检定方法的基础上,应用16S rRNA基因分析、聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）血清分型、多位点序列分型（multilocus sequence type,MLST）和脉冲场凝胶电泳（pulsed field gel electrophoresis,PFGE）分型等多种分子生物学质控方法,对来源于中国医学细菌保藏管理中心的20株19群肺炎链球菌国家标准菌株进行分析。结果 20株19群肺炎链球菌的16S rRNA基因序列与肺炎链球菌模式株NCTC 7465的16S rRNA基因序列的相似性在99.64%～100%之间,碱基差异0～5 bp。PCR血清分型结果表明:11株19F型菌株均检测到大小为304 bp的19F型特异性扩增条带,6株19A型菌株均检测到大小为478 bp的19A型特异性扩增条带,PCR血清分型结果与血清凝集试验结果一致。MLST分型结果表明,相同血清型... 

【文章来源】：微生物学免疫学进展. 2019,47(06)

【文章页数】：8 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 菌种
    1.2 主要试剂及仪器
    1.3 培养特性观察
    1.4血清凝集试验
    1.5 肺炎链球菌分子质控方法
        1.5.1 16S rRNA基因分析
        1.5.2 PCR血清分型
        1.5.3 多位点序列分型
        1.5.4 肺炎链球菌脉冲场凝胶电泳试验
    1.6 肺炎链球菌菌株的传代稳定性考察
2 结果
    2.1 培养特性观察
    2.2 血清凝集试验
    2.3 肺炎链球菌分子质控
        2.3.1 16S rRNA基因分析
        2.3.2 PCR血清分型
        2.3.3 多位点序列分型
        2.3.4 脉冲场凝胶电泳分型
    2.4 肺炎链球菌菌株的传代稳定性考察
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]11群肺炎链球菌荚膜多糖合成相关基因的分子生物学研究[J]. 陈琼,龙新星,李红,李康,黄洋,陈翠萍,叶强.  微生物学免疫学进展. 2018(05)
[2]肺炎球菌性疾病免疫预防专家共识（2017版）[J]. 王华庆,安志杰.  中国预防医学杂志. 2018(03)
[3]细菌回复突变试验标准菌株分子质控方法的研究[J]. 徐潇,石继春,梁丽,孙文媛,杨越,叶强.  微生物学免疫学进展. 2017(06)
[4]应用分子生物学方法鉴定6群肺炎链球菌血清型[J]. 陈琼,李康,梁丽,龙新星,黄洋,石继春,叶强.  微生物学免疫学进展. 2016(04)
[5]应用whaF基因序列鉴定20型肺炎链球菌血清型[J]. 陈琼,李康,徐潇,黄洋,李红,王春娥,陈翠萍,叶强.  微生物学免疫学进展. 2016(02)
[6]我国部分地区肺炎链球菌血清分型与脉冲场凝胶电泳分型分析[J]. 李马超,张麒,任红宇,周海健,李倩,邵祝军.  中国疫苗和免疫. 2010(03)
[7]肺炎链球菌分子分型方法研究进展[J]. 杨越,叶强.  中华微生物学和免疫学杂志. 2013 (10)



本文编号：3188845