分枝杆菌PPE38蛋白与宿主相互作用机制的研究

发布时间：2021-06-12 05:09

　　结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis）是人类结核病的致病菌,目前,预计全球约有1/3的人群被结核分枝杆菌感染。虽然结核病是一个古老的疾病,但是到目前为止,我们对其致病机理仍所知有限,缺乏有效的治疗手段与疫苗。结核分枝杆菌基因组上,存在两个特殊的基因家族-PE/PPE家族,约占到结核分枝杆菌基因组编码区的10%。由于PE/PPE家族蛋白含有大量的重复单元,所以一直以来都被认为是发生重组与突变的热点区域,而且不同的PE/PPE蛋白在不同的菌株中存在序列的多态性,所以人们猜测结核分枝杆菌可能是通过该家族进行抗原变异,从而逃逸宿主的免疫反应。前期我们利用海分枝杆菌（Mycobacterium marinum）转座子随机插入突变库筛选到3株ppe38的突变菌株,研究发现：海分枝杆菌ppe38突变株（05B1）中典型的索状结构消失；细胞定位实验证明PPE38蛋白位于细胞壁外侧；在巨噬细胞感染实验中,发现PPE38蛋白能够诱导促炎因子TNF-a和IL-6的高表达,同时05B1对巨噬细胞的侵染能力显著降低；在斑马鱼感染实验中,05B1相较于野生株（WT）毒力显著降低,肝脏... 

【文章来源】：复旦大学上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：117 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要
Abstract
第一章 利用SILAC/AACT技术预测分枝杆菌PPE38蛋白与宿主巨噬细胞之间的相互作用机制
    前言
    实验材料
    实验方法
    实验结果
        1.1. 差异表达蛋白的鉴定
        1.2. 差异表达蛋白的生物学功能分析
        1.3. PPE38蛋白刺激巨噬细胞胞内信号通路的分析
        1.4. PPE38蛋白影响宿主抗原的加工与递呈
        1.5. PPE38蛋白刺激引起的巨噬细胞内转录调控网络
        1.6. 利用Western blot验证质谱结果的可靠性
    讨论
        1. PPE38蛋白参与调节宿主免疫反应
        2. PPE38蛋白与细胞死亡
第二章 分枝杆菌PPE38蛋白与宿主免疫系统的相互作用研究
    前言
    实验材料
    实验方法
    实验结果
        2.1. PPE38蛋白促进分枝杆菌侵染巨噬细胞
        2.2. PPE38蛋白不能特异引起细胞死亡
        2.3. PPE38蛋白在固有免疫中的作用有限
        2.4. PPE38蛋白促进斑马鱼体内TNF-α-的分泌
        2.5. PPE38蛋白降低巨噬细胞表面MHC-1分子的表达
        2.6. PPE38蛋白增强耻垢分枝杆菌在小鼠中的存活
        2.7. PPE38蛋白抑制CD8+T细胞的激活
    讨论
        1. PPE38蛋白主要在适应性免疫过程中发挥作用
        2. PPE38蛋白在细菌侵染而非细胞死亡过程中发挥重要作用
        3. PPE38蛋白与细胞因子的分泌
第三章 综述
参考文献
附录
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]从海分枝杆菌菌落形态变化筛选与毒力相关基因的方法[J]. 张玮祥,于佳,高谦.  复旦学报(医学版). 2009(05)
[2]MAPK signal pathways in the regulation of cell proliferation in mammalian cells[J]. WEI ZHANG, Hui Tu LIU The Key Laboratory of Cell Proliferation and Regulation Biology of Ministry of Education, College of Life Sciences, Beijing Normal University, Beijing 100875, China.  Cell Research. 2002(01)



本文编号：3226010