TLR4在C3H/HeJ小鼠军团菌感染模型中的作用
发布时间：2021-06-19 22:24
目的1.建立军团菌感染的小鼠模型，探讨TLR4与军团菌感染的关系。2.通过比较TLR4蛋白及其信号转导通路中相关细胞因子的表达，初步阐明TLR4在军团菌感染中的作用机制。方法1. TLR4基因突变型小鼠C3H/HeJ小鼠、C3H/HeN小鼠作为实验动物，6-8周，每组8只，雌雄各半。设立C3H/HeJ染菌组、C3H/HeN染菌组、C3H/HeN对照组三个实验组。C3H/HeN对照组作为C3H/HeJ染菌组、C3H/HeN染菌组的共同对照组。染菌组气管注射50ul1.2×107cfu/ml军团菌菌悬液，对照组气管注射50ul无菌生理盐水，分别于染菌后12小时、24小时、48小时、72小时处死小鼠。2.处死小鼠前采集眼眶血约2ml,用流式细胞术检测各组PBMC TLR4蛋白的表达量，分析三组各时间点TLR4蛋白表达水平的变化。处死小鼠后，取染菌组和对照组的小鼠每个时间点左肺上叶约0.02g固定做病理切片;3.将剩余肺组织匀浆，用酶联免疫吸附法检测各组肺组织中TNF-α和IL-1β的含量。结果①C3H/HeJ小鼠和C3H/HeN小鼠进行生存实验时，C3H/HeJ小鼠的病...
【文章来源】：山西医科大学山西省
【文章页数】：54 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
各组肺组织C3H/HeN对照组400×
图6三组肺组织TNF-α水平边际均数图3.2 IL-1β与军团菌感染的关系3.2.1绘制标准曲线以试剂盒推荐的浓度配制标准品浓度，在酶标仪 450nm 处测量 OD 值，以标准品的浓度为横坐标，OD 值为纵坐标，在 Excel 表格中绘制标准曲线。见表3-3 和图 7。表3-3 IL-1β标准品浓度（pg/ml）和OD值标准品 1 2 3 4 5 6 7 8浓度 0 15.625 31.25 62.5 125 250 500 1000OD 值 0.138 0.199 0.165 0.206 0.250 0.294 0.636 1.141
脏脏器系数差异有统计学意义（F=3.765,P=0.028），各个时间点之间差异没有统计学意义（F=2.296,P=0.084），分组和时间点之间交互作用差异有统计学意义（F=3.509,P=0.004）。经 LSD 法两两比较，CH/HeJ 染菌组、C3H/HeN 染菌组与 C3H/HeN 对照组间均有统计学差异，C3H/HeJ 染菌组和 C3H/HeN 染菌组的脏器系数均高于 C3H/HeN 对照组。见表 1-2。肺脏脏器系数边际均数图见图2。表1-2三组肺脏脏器系数时间点 C3H/HeJ 染菌组( x s)C3H/HeN 染菌组( x s)C3H/HeN 对照组( x s)12 小时 0.0068±0.0008 0.0088±0.0023 0.0079±0.001924 小时 0.0078±0.0014 0.0076±0.0006 0.0063±0.000748 小时 0.0078±0.0009 0.0064±0.0007 0.0066±0.001272 小时 0.0079±0.0007 0.0075±0.0009 0.0066±0.0013
【参考文献】：
期刊论文
[1]TLR4/MyD88信号通路与肾脏疾病相关性的研究进展[J]. 孙凤杰,董文斌. 泸州医学院学报. 2010(01)
[2]TNF-α、IL-6、IL-8和sICAM-1与嗜肺军团菌感染关系的研究[J]. 任吉莲,王桂琴. 中国微生态学杂志. 2008(02)
[3]LPS对BALB/C小鼠肾小管上皮细胞TLR4和TNFα、IL-6表达的影响[J]. 朱晓玲,王永钧,杨亚珍,Steven Sacks. 医学研究杂志. 2008(01)
[4]一起非肺炎型军团病暴发的病原学分析[J]. 李旭,王晓梅,彭晓旻. 中国卫生检验杂志. 2005(08)
[5]军团菌在巨噬细胞与中性粒细胞内的生长效应研究[J]. 韩丽辉,孙汶生,贾晓青,刘素侠,王晓燕,高立芬,曹英林,Yousef Abu Kwaik. 中华医院感染学杂志. 2005(07)
[6]军团菌病的监测与防治[J]. 邵祝军. 疾病监测. 2005(06)
[7]军团杆菌的预防控制方法研究进展[J]. 林海江,郭奕芳,陈悦. 中国消毒学杂志. 2005(02)
[8]内毒素受体CD14、TLR4在脂多糖（LPS）致小鼠肺、肝功能损伤中的变化[J]. 杜烨玮,孙仁宇. 中国病理生理杂志. 2003(11)
[9]军团菌病[J]. 胡大林,廖建坤,杨光,欧阳小明. 国外医学(卫生学分册). 2003(04)
[10]北京郊区某新兵训练营地发生一起博杰曼军团菌病爆发[J]. 邓长英,房兴胜,万超群,任红宇,邱琼,杨选平,张树修,王士堂,姜威. 中华流行病学杂志. 2001(03)
本文编号：3238654
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【文章页数】：54 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
各组肺组织C3H/HeN对照组400×
图6三组肺组织TNF-α水平边际均数图3.2 IL-1β与军团菌感染的关系3.2.1绘制标准曲线以试剂盒推荐的浓度配制标准品浓度，在酶标仪 450nm 处测量 OD 值，以标准品的浓度为横坐标，OD 值为纵坐标，在 Excel 表格中绘制标准曲线。见表3-3 和图 7。表3-3 IL-1β标准品浓度（pg/ml）和OD值标准品 1 2 3 4 5 6 7 8浓度 0 15.625 31.25 62.5 125 250 500 1000OD 值 0.138 0.199 0.165 0.206 0.250 0.294 0.636 1.141
脏脏器系数差异有统计学意义（F=3.765,P=0.028），各个时间点之间差异没有统计学意义（F=2.296,P=0.084），分组和时间点之间交互作用差异有统计学意义（F=3.509,P=0.004）。经 LSD 法两两比较，CH/HeJ 染菌组、C3H/HeN 染菌组与 C3H/HeN 对照组间均有统计学差异，C3H/HeJ 染菌组和 C3H/HeN 染菌组的脏器系数均高于 C3H/HeN 对照组。见表 1-2。肺脏脏器系数边际均数图见图2。表1-2三组肺脏脏器系数时间点 C3H/HeJ 染菌组( x s)C3H/HeN 染菌组( x s)C3H/HeN 对照组( x s)12 小时 0.0068±0.0008 0.0088±0.0023 0.0079±0.001924 小时 0.0078±0.0014 0.0076±0.0006 0.0063±0.000748 小时 0.0078±0.0009 0.0064±0.0007 0.0066±0.001272 小时 0.0079±0.0007 0.0075±0.0009 0.0066±0.0013
【参考文献】：
期刊论文
[1]TLR4/MyD88信号通路与肾脏疾病相关性的研究进展[J]. 孙凤杰,董文斌. 泸州医学院学报. 2010(01)
[2]TNF-α、IL-6、IL-8和sICAM-1与嗜肺军团菌感染关系的研究[J]. 任吉莲,王桂琴. 中国微生态学杂志. 2008(02)
[3]LPS对BALB/C小鼠肾小管上皮细胞TLR4和TNFα、IL-6表达的影响[J]. 朱晓玲,王永钧,杨亚珍,Steven Sacks. 医学研究杂志. 2008(01)
[4]一起非肺炎型军团病暴发的病原学分析[J]. 李旭,王晓梅,彭晓旻. 中国卫生检验杂志. 2005(08)
[5]军团菌在巨噬细胞与中性粒细胞内的生长效应研究[J]. 韩丽辉,孙汶生,贾晓青,刘素侠,王晓燕,高立芬,曹英林,Yousef Abu Kwaik. 中华医院感染学杂志. 2005(07)
[6]军团菌病的监测与防治[J]. 邵祝军. 疾病监测. 2005(06)
[7]军团杆菌的预防控制方法研究进展[J]. 林海江,郭奕芳,陈悦. 中国消毒学杂志. 2005(02)
[8]内毒素受体CD14、TLR4在脂多糖（LPS）致小鼠肺、肝功能损伤中的变化[J]. 杜烨玮,孙仁宇. 中国病理生理杂志. 2003(11)
[9]军团菌病[J]. 胡大林,廖建坤,杨光,欧阳小明. 国外医学(卫生学分册). 2003(04)
[10]北京郊区某新兵训练营地发生一起博杰曼军团菌病爆发[J]. 邓长英,房兴胜,万超群,任红宇,邱琼,杨选平,张树修,王士堂,姜威. 中华流行病学杂志. 2001(03)
本文编号：3238654
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