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大鼠口腔常在菌的分离培养与鉴定

发布时间:2021-07-01 12:33
  目的研究Wistar大鼠口腔常在菌的种类、形态,与人类口腔常在菌种比较,探讨Wistar大鼠和人类有关菌群的差异和相似性,寻找适合人类口腔微生物和疾病研究的模型动物。方法用60%高糖水饲喂法构建大鼠菌斑模型,提取菌斑在丰富营养培养基划线培养,革兰氏染色观察形态并进行16S rRNA基因扩增和测序。结果经分离培养和鉴定共筛选出粪肠球菌、发酵乳杆菌、唾液链球菌3种细菌。结论大鼠口腔微生物种类与人类相似,是较好的人类口腔微生物和疾病研究的模型动物。 

【文章来源】:泰山医学院学报. 2019,40(11)

【文章页数】:5 页

【部分图文】:

大鼠口腔常在菌的分离培养与鉴定


大鼠牙合面菌斑染色结果2.2细菌在不同培养基上的生长情况

细菌,革兰氏染色


2.3革兰氏染色结果革兰氏染色结果显示3种细菌染色后都为紫色,提示它们都为革兰氏阳性菌。1号细菌为圆形或椭圆形,成对或短链式生长,见图3(A)。2号细菌呈细长杆状,中等大小,多数单个分布,少数成对分布,见图3(B)。3号细菌为圆形或椭圆形,链状排列,长短不一,见图3(C)。A.1号细菌;B.2号细菌;C.3号细菌图3革兰氏染色结果2.416SrRNA基因扩增和测序16SrRNA基因扩增显示3种细菌都出现了1500bp左右的目标条带,无杂带,特异性较好。1号细菌亮度最大,其次是3号细菌,2号细菌亮度较淡,见图4。序列比对结果显示1号细菌为粪肠球菌(En-terococcusfaecalis),2号细菌为发酵乳杆菌(Lactoba-cillusfermentum),3号细菌为唾液链球菌(Streptococ-cussalivarius)。图43种细菌产物凝胶电泳图3讨论本实验成功建立了菌斑模型,见图1。从中分离到粪肠球菌(Enterococcusfaecalis),发酵乳杆菌(Lactobacillusfermentum)和唾液链球菌(Streptococ-cussalivarius)。大量的研究显示这3种细菌同时存在于人类口腔中[10]。这3种细菌都属于厚壁菌门(Firmicutes)、芽胞杆菌纲(Bacillales)、乳杆菌目(Lactobacillales)。粪肠球菌属于肠球菌科(Entero-coccaceae)、肠球菌属(Enterococcus),在难治性根尖周炎中,粪肠球菌的检出率高达77%[11],一般以单一感染为主[12]。本实验中,大鼠的牙菌斑中检测出粪肠球菌为主要优势菌之一。大多数根尖周炎继发于牙髓疾病,而牙髓疾病是由于龋病、外伤等波及牙本质深层,刺激

凝胶电泳,细菌,粪肠球菌,龋病


??残位蛲衷残危?醋?排列,长短不一,见图3(C)。A.1号细菌;B.2号细菌;C.3号细菌图3革兰氏染色结果2.416SrRNA基因扩增和测序16SrRNA基因扩增显示3种细菌都出现了1500bp左右的目标条带,无杂带,特异性较好。1号细菌亮度最大,其次是3号细菌,2号细菌亮度较淡,见图4。序列比对结果显示1号细菌为粪肠球菌(En-terococcusfaecalis),2号细菌为发酵乳杆菌(Lactoba-cillusfermentum),3号细菌为唾液链球菌(Streptococ-cussalivarius)。图43种细菌产物凝胶电泳图3讨论本实验成功建立了菌斑模型,见图1。从中分离到粪肠球菌(Enterococcusfaecalis),发酵乳杆菌(Lactobacillusfermentum)和唾液链球菌(Streptococ-cussalivarius)。大量的研究显示这3种细菌同时存在于人类口腔中[10]。这3种细菌都属于厚壁菌门(Firmicutes)、芽胞杆菌纲(Bacillales)、乳杆菌目(Lactobacillales)。粪肠球菌属于肠球菌科(Entero-coccaceae)、肠球菌属(Enterococcus),在难治性根尖周炎中,粪肠球菌的检出率高达77%[11],一般以单一感染为主[12]。本实验中,大鼠的牙菌斑中检测出粪肠球菌为主要优势菌之一。大多数根尖周炎继发于牙髓疾病,而牙髓疾病是由于龋病、外伤等波及牙本质深层,刺激通过牙本质小管传入牙髓,引起牙髓组织炎症或修复反应[13]。究其源头有一部分是由于龋病引起难治性根尖周炎,而上世纪50年代Or-land和Fifzgerald等就认识到,龋病无菌斑不成立[14],菌斑中的粪肠球菌会通过牙本质小管进入牙?

【参考文献】:
期刊论文
[1]龋病微生物因素研究进展[J]. 陈婧,程磊,周学东,彭显.  华西口腔医学杂志. 2018(01)
[2]口腔乳酸杆菌的分离及其益生特性[J]. 杨娟,堵国成,陈坚,方芳.  微生物学报. 2013(04)
[3]口腔癌的鼠科动物模型研究进展[J]. 陈梁,周海文.  临床口腔医学杂志. 2011(08)
[4]PCR同时检测变形链球菌和远缘链球菌[J]. 谭海平,边专,樊明文,杜民权,范兵.  口腔医学研究. 2006(06)
[5]小型猪、大鼠及人口腔常见菌群的比较研究[J]. 李岩涛,李金陆,杨圣辉,夏登胜,张春梅,王松灵.  北京口腔医学. 2006(03)

硕士论文
[1]常用实验动物与人肠道、口腔、生殖道微生物组比较[D]. 顾东曙.南方医科大学 2016



本文编号:3259141

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