MAPK4/MK5通路调控CD4 + T细胞体外活化及功能的研究
发布时间：2021-07-09 10:24
本课题研究包括两部分内容,第一部分:下调MAPK4的表达对CD4+T细胞体外活化及功能的影响。第二部分:MAPK4/MK5通路对CD4+T细胞体外活化及功能的影响。分述如下:目的:第一部分:利用MAPK4 RNAi干扰载体,结合MAPK4基因敲除小鼠模型,通过磁珠分选技术、流式细胞技术、CCK8检测法、实时荧光定量PCR实验以及分子克隆技术,观察下调MAPK4的表达对CD4+T细胞体外活化及功能的影响。第二部分:利用RNAi干扰技术,结合磁珠分选技术、流式细胞技术、CCK8检测法、实时荧光定量PCR以及Western Blot实验技术,探讨MAPK4/MK5通路对CD4+T细胞体外活化及功能的影响。方法:第一部分1.利用RNAi干扰技术原理,构建MAPK4 RNAi真核表达载体（p-MAPK4RNAi）和对照载体（p-Cont）。通过基因测序验证,将构建成功的载体瞬时转染入磁珠分选（magnetic cell sorting,MACS）技术获得的野生型小鼠脾脏CD4+CD62L...
【文章来源】：遵义医科大学贵州省
【文章页数】：90 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
CD4+T细胞及其功能亚群Figure1.CD4+Tcellsandfunctionalsubgroups
图 2. CD4+T 细胞功能的相关信号传导途径Figure 2. The function of CD4+T cells and related signaling pathway 信号通路概述活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase, MAPK）是细胞氨酸/苏氨酸蛋白激酶，在胞浆中激活后对细胞的增殖、分化和控作用[38-41]。哺乳动物细胞中，MAPK 家族主要包括：细胞外/2（Extracelluar-regulated Kinase 1/2, ERK 1/2）、c-Jun 氨基酸-terminal kinase, JNK）/ 应激活化蛋白激酶（stress-activatePK）、p38MAPK 和 ERK5 四个主要亚群，通过信号通路的级扩大，最终对细胞的生物学功能发挥调控作用（图 3）。其中，内信号转导途径被认为是经典 MAPK 信号转导途径，它是
VEGFR2 信号通路轴被激活，导致下游效应分子激活 transcription factor-2，ATF2）发挥调控作用[45]。类似的，R（Ras-related C3 botulinum toxin substrate，Rac）和细胞分裂nant Cell Division Cycle Protein 42，Cdc42）也可通过 nases）激酶激活 p38[46]。此外，p38MAPK 与 c-myc 基因表达as 介导的凋亡信号转导密切相关，参与了细胞的凋亡过程[4示，MAPK 家族成员参与了 CD4+T 细胞的活化、增殖及相关umacher 等[52]报道，ERK3 蛋白磷酸化与 MK5 的协同作的活化过程中发挥重要作用。类似的，Samelson 等[53]研究信号生化效应介导了 CD4+T 细胞的增殖、分化等生物学功 信号通路与 T 细胞的活化、增殖等生物学功能密切相关，然于更深一步的研究探讨。
【参考文献】：
期刊论文
[1]MicroRNA-7在CD4+T细胞体外活化中的表达及意义[J]. 徐华林,赵娟娟,崔盼盼,郭萌萌,陶弋婧,陈超,徐林. 中国免疫学杂志. 2016(10)
[2]microRNA-7基因敲减对小鼠CD4+SP细胞胸腺发育的影响[J]. 陶弋婧,朱顺飞,陈超,赵娟娟,郭萌萌,张忆雄,秦娜林,徐林. 中国免疫学杂志. 2015(09)
[3]自身启动子调控miR-7真核表达载体的构建及其意义[J]. 郭萌萌,廖珍媛,赵娟娟,陶弋婧,胡燕,陈超,秦娜琳,郑静,徐林. 遵义医学院学报. 2015(03)
[4]Increased serum IL-10 in lupus patients promotes apoptosis of T cell subsets via the caspase 8 pathway initiated by Fas signaling[J]. Xiaofan Yang,Bin Sun,Huijuan Wang,Cheng Yin,Xiaole Wang,Xiaohui Ji. The Journal of Biomedical Research. 2015(03)
[5]过表达microRNA-7通过下调CGG结合蛋白1的表达抑制人肺癌细胞生长[J]. 胡燕,廖珍媛,陈超,秦娜琳,郑静,田丹,李永菊,朱顺飞,罗军敏,徐林. 细胞与分子免疫学杂志. 2014(02)
[6]miRNA-7在小鼠不同组织器官中表达的检测及其意义[J]. 郑静,李颖,秦安东,秦娜琳,罗军敏,徐林. 遵义医学院学报. 2012(02)
本文编号：3273570
【文章来源】：遵义医科大学贵州省
【文章页数】：90 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
CD4+T细胞及其功能亚群Figure1.CD4+Tcellsandfunctionalsubgroups
图 2. CD4+T 细胞功能的相关信号传导途径Figure 2. The function of CD4+T cells and related signaling pathway 信号通路概述活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase, MAPK）是细胞氨酸/苏氨酸蛋白激酶，在胞浆中激活后对细胞的增殖、分化和控作用[38-41]。哺乳动物细胞中，MAPK 家族主要包括：细胞外/2（Extracelluar-regulated Kinase 1/2, ERK 1/2）、c-Jun 氨基酸-terminal kinase, JNK）/ 应激活化蛋白激酶（stress-activatePK）、p38MAPK 和 ERK5 四个主要亚群，通过信号通路的级扩大，最终对细胞的生物学功能发挥调控作用（图 3）。其中，内信号转导途径被认为是经典 MAPK 信号转导途径，它是
VEGFR2 信号通路轴被激活，导致下游效应分子激活 transcription factor-2，ATF2）发挥调控作用[45]。类似的，R（Ras-related C3 botulinum toxin substrate，Rac）和细胞分裂nant Cell Division Cycle Protein 42，Cdc42）也可通过 nases）激酶激活 p38[46]。此外，p38MAPK 与 c-myc 基因表达as 介导的凋亡信号转导密切相关，参与了细胞的凋亡过程[4示，MAPK 家族成员参与了 CD4+T 细胞的活化、增殖及相关umacher 等[52]报道，ERK3 蛋白磷酸化与 MK5 的协同作的活化过程中发挥重要作用。类似的，Samelson 等[53]研究信号生化效应介导了 CD4+T 细胞的增殖、分化等生物学功 信号通路与 T 细胞的活化、增殖等生物学功能密切相关，然于更深一步的研究探讨。
【参考文献】：
期刊论文
[1]MicroRNA-7在CD4+T细胞体外活化中的表达及意义[J]. 徐华林,赵娟娟,崔盼盼,郭萌萌,陶弋婧,陈超,徐林. 中国免疫学杂志. 2016(10)
[2]microRNA-7基因敲减对小鼠CD4+SP细胞胸腺发育的影响[J]. 陶弋婧,朱顺飞,陈超,赵娟娟,郭萌萌,张忆雄,秦娜林,徐林. 中国免疫学杂志. 2015(09)
[3]自身启动子调控miR-7真核表达载体的构建及其意义[J]. 郭萌萌,廖珍媛,赵娟娟,陶弋婧,胡燕,陈超,秦娜琳,郑静,徐林. 遵义医学院学报. 2015(03)
[4]Increased serum IL-10 in lupus patients promotes apoptosis of T cell subsets via the caspase 8 pathway initiated by Fas signaling[J]. Xiaofan Yang,Bin Sun,Huijuan Wang,Cheng Yin,Xiaole Wang,Xiaohui Ji. The Journal of Biomedical Research. 2015(03)
[5]过表达microRNA-7通过下调CGG结合蛋白1的表达抑制人肺癌细胞生长[J]. 胡燕,廖珍媛,陈超,秦娜琳,郑静,田丹,李永菊,朱顺飞,罗军敏,徐林. 细胞与分子免疫学杂志. 2014(02)
[6]miRNA-7在小鼠不同组织器官中表达的检测及其意义[J]. 郑静,李颖,秦安东,秦娜琳,罗军敏,徐林. 遵义医学院学报. 2012(02)
本文编号：3273570
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