海马神经元雄激素膜结合位点的研究及其介导的CaM/CaMKⅡ信号通路对突触蛋白PSD95的影响
发布时间：2021-07-28 02:38
目的:以SD大鼠原代海马神经元为研究对象,寻求雄激素膜结合位点存在的直接证据,验证原代海马神经元雄激素膜结合位点的存在及与胞内受体的异同点同时进一步探究表达膜结合位点的神经元的类型。之后,明确雄激素非基因组途径对海马神经元突触蛋白PSD95的影响,并阐明CaM/CaMKⅡ信号通路的影响机制,以充分理解雄激素发挥生理作用的方式,为进一步推动雄激素的神经保护机制的研究提供突触可塑性方面的依据。方法:1海马神经元雄激素膜受体的研究（1）验证海马神经元雄激素膜结合位点（膜受体）的存在选用孕18 d的SD大鼠,麻醉后取出胎鼠,无菌取脑、剥离海马,消化、吹打、重悬过滤后,接种于共聚焦培养皿。培养至1520 d,随机分为BSA-FITC组和T-BSA-FITC组。分别孵育BSA-FITC和T-BSA-FITC 15min。激光共聚焦显微镜观察T-BSA-FITC与海马神经元细胞膜的结合情况,验证海马神经元雄激素膜结合位点（膜受体）的存在。（2）海马神经元雄激素膜受体与胞内受体的差异性研究选用孕18 d的SD大鼠,麻醉后取出胎鼠,无菌取脑、剥离海马,消化、吹打、重悬过滤后,接种于...
【文章来源】：河北医科大学河北省
【文章页数】：70 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
验证海马神经元雄激素膜受体的存在Fig.1Verifythepresenceofandrogenmembranebindingsites(membranereceptors)inhippocampalneuronsT-BSA-FITCgroup:A-1(brightfield),A-2(T-BSA-FITC),A-3(merge).BSA-FITCgroup:B-1(brightfield),B-2(BSA-FITC),B-3(merge).Bar=50
27图 2 海马神经元雄激素膜结合位点与胞内受体的差异性研究ig.2 Study on the difference of androgen membrane receptors aintracellular receptors in hippocampal neuronsSA-FITC group: A-1 (bright field), A-2 (T-BSA-FITC), A-3 BSA-FITC group: B-1 (bright field), B-2 (BSA-FITC), B-3 0 μm.
28图 3 表达雄激素膜受体的海马神经元类型（谷氨酸能神经元）研究Fig.3 Study on the type of hippocampal neurons expressing androgenmembrane receptors (glutamatergic neurons)Antibody: vGLUT1 antibody. A (Hoechst), B (T-BSA-FITC), C (vGluT1), D(merge). Bar=100 μm.
【参考文献】：
期刊论文
[1]糖皮质激素对小胶质细胞内钙的影响[J]. 何舒翘,钱旭,张贵平,张维文,张梅. 中国药理学通报. 2017(06)
[2]钙调蛋白结构、性质及其细胞生物学功能的研究进展[J]. 李庆伟,张撼,逄越. 辽宁师范大学学报(自然科学版). 2017(01)
[3]突触后致密蛋白95（PSD95）和突触小泡蛋白在神经元成熟过程中的分布[J]. 柴继侠,王元元,李徽徽,贺文欣,邹维艳,周艳梅,胡小冬,柴强. 细胞与分子免疫学杂志. 2016(12)
[4]外周血中钙调蛋白对阿尔茨海默病的诊断价值[J]. 高丽丽,唐咏春,毛德军,邢岩. 中国医药导报. 2016(02)
[5]卵巢移植对去势大鼠海马神经元PSD-95表达的影响[J]. 王丽梅,刘芳,黑常春,吴凯,郑小敏,朱万平,常青,赵承军. 宁夏医科大学学报. 2015(07)
[6]PSD-95参与大鼠孕期铅暴露对子代海马突触影响的实验研究[J]. 赵再华,郑刚,骆文静,陈景元,沈学锋. 神经解剖学杂志. 2015(03)
[7]三七总皂苷对局灶性脑缺血大鼠不同恢复时点神经重塑和突触重建的影响[J]. 刘炜,刘丽星,史晓伟,张晓萌,施怡,朱陵群. 中华中医药杂志. 2015(05)
[8]通窍活血汤对血管性痴呆大鼠学习记忆功能及海马神经元细胞内钙离子浓度的影响[J]. 葛朝亮,王鑫铭,李飞龙,汪宁,许杜娟. 中国药学杂志. 2015(08)
[9]钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ的分子调节与突触可塑性[J]. 贺文彬,张俊龙,于龙川,陈乃宏. 中国药理学通报. 2014(07)
[10]复方颐神养脑胶囊对多发性脑梗死痴呆大鼠的影响[J]. 周青罡,李俊,舒心莹,朱伟,陈筱,陈兰英. 中国实验方剂学杂志. 2014(04)
博士论文
[1]类固醇激素20-羟基蜕皮酮通过增加细胞内钙离子水平促进自噬向凋亡转化[D]. 李永波.山东大学 2017
本文编号：3307027
【文章来源】：河北医科大学河北省
【文章页数】：70 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
验证海马神经元雄激素膜受体的存在Fig.1Verifythepresenceofandrogenmembranebindingsites(membranereceptors)inhippocampalneuronsT-BSA-FITCgroup:A-1(brightfield),A-2(T-BSA-FITC),A-3(merge).BSA-FITCgroup:B-1(brightfield),B-2(BSA-FITC),B-3(merge).Bar=50
27图 2 海马神经元雄激素膜结合位点与胞内受体的差异性研究ig.2 Study on the difference of androgen membrane receptors aintracellular receptors in hippocampal neuronsSA-FITC group: A-1 (bright field), A-2 (T-BSA-FITC), A-3 BSA-FITC group: B-1 (bright field), B-2 (BSA-FITC), B-3 0 μm.
28图 3 表达雄激素膜受体的海马神经元类型（谷氨酸能神经元）研究Fig.3 Study on the type of hippocampal neurons expressing androgenmembrane receptors (glutamatergic neurons)Antibody: vGLUT1 antibody. A (Hoechst), B (T-BSA-FITC), C (vGluT1), D(merge). Bar=100 μm.
【参考文献】：
期刊论文
[1]糖皮质激素对小胶质细胞内钙的影响[J]. 何舒翘,钱旭,张贵平,张维文,张梅. 中国药理学通报. 2017(06)
[2]钙调蛋白结构、性质及其细胞生物学功能的研究进展[J]. 李庆伟,张撼,逄越. 辽宁师范大学学报(自然科学版). 2017(01)
[3]突触后致密蛋白95（PSD95）和突触小泡蛋白在神经元成熟过程中的分布[J]. 柴继侠,王元元,李徽徽,贺文欣,邹维艳,周艳梅,胡小冬,柴强. 细胞与分子免疫学杂志. 2016(12)
[4]外周血中钙调蛋白对阿尔茨海默病的诊断价值[J]. 高丽丽,唐咏春,毛德军,邢岩. 中国医药导报. 2016(02)
[5]卵巢移植对去势大鼠海马神经元PSD-95表达的影响[J]. 王丽梅,刘芳,黑常春,吴凯,郑小敏,朱万平,常青,赵承军. 宁夏医科大学学报. 2015(07)
[6]PSD-95参与大鼠孕期铅暴露对子代海马突触影响的实验研究[J]. 赵再华,郑刚,骆文静,陈景元,沈学锋. 神经解剖学杂志. 2015(03)
[7]三七总皂苷对局灶性脑缺血大鼠不同恢复时点神经重塑和突触重建的影响[J]. 刘炜,刘丽星,史晓伟,张晓萌,施怡,朱陵群. 中华中医药杂志. 2015(05)
[8]通窍活血汤对血管性痴呆大鼠学习记忆功能及海马神经元细胞内钙离子浓度的影响[J]. 葛朝亮,王鑫铭,李飞龙,汪宁,许杜娟. 中国药学杂志. 2015(08)
[9]钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ的分子调节与突触可塑性[J]. 贺文彬,张俊龙,于龙川,陈乃宏. 中国药理学通报. 2014(07)
[10]复方颐神养脑胶囊对多发性脑梗死痴呆大鼠的影响[J]. 周青罡,李俊,舒心莹,朱伟,陈筱,陈兰英. 中国实验方剂学杂志. 2014(04)
博士论文
[1]类固醇激素20-羟基蜕皮酮通过增加细胞内钙离子水平促进自噬向凋亡转化[D]. 李永波.山东大学 2017
本文编号：3307027
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