不同功能基团对3型肺炎球菌荚膜多糖免疫原性影响的初步研究
发布时间：2021-08-31 11:29
目的比较3型肺炎链球菌荚膜多糖不同基团活化对多糖抗原性及结合物免疫原性的影响。方法分别采用1-氰基-4-二甲氨基-吡啶四氟硼酸（1-cyano-4-dimethylaminopyridinium tetrafluoroborate, CDAP）活化多糖羟基,碳二亚胺（1-（3-dimethylaminopropyl）-3-ethylcarbodiimide hydrochloride, EDC）活化多糖羧基,再与己二酰肼（adipic dihydrazide, ADH）偶联获得活化度相近的多糖衍生物。用三硝基苯磺酸方法（trinitrobenzene sulfonic acid, TNBS）测定多糖活化度;高效液相分子排阻与多角度激光散射仪联用（HPLC-SEC-MALLS）分析衍生物分子分布和大小;Zeta电位仪与滴定仪联用分析其表面电荷变化;速率比浊法和免疫双扩散法比较其抗原性变化;利用多糖衍生物与载体蛋白偶联获得的不同结合物免疫小鼠,间接ELISA分析不同结合物免疫后的IgG抗体浓度,进一步阐述活化过程中多糖抗原性的变化对结合物免疫原性的影响。结果 TNBS结果显示,获得同一基团...
【文章来源】：微生物学免疫学进展. 2020,48(01)
【文章页数】：9 页
【部分图文】：
3型多糖重复单位结构
表2 不同碳二亚胺比例对多糖羧基活化度的影响实验结果Tab.2 The effect to derivatives from carboxyl group activated with different degree of EDC 编号 碳二亚胺/(mmol/L) 活化度/% Mw/(g/mol) (质量比) (摩尔比) 3-COO-AH-1 5 5.91 10 0.87×105 3-COO-AH-2 10 9.26 16 1.08×105 3-COO-AH-3 20 13.30 23 1.33×105 3-COO-AH-4 50 20.93 36 4.51×1052.3 多糖及衍化物等电点分析
表4 不同基团活化度对多糖抗原性的影响实验结果Tab.4 The effect to antigenicity for derivatives from activated chemical groups activated with different degree 编号 活化度/% 多糖质量浓度A/(μg/mL) 多糖质量浓度B/(μg/mL) 多糖单位抗原值(B/A) 参考多糖 0.00 1 000.00 1 000.00 1.00 3-CN-AH-1 7.49 275.84 236.00 0.86 3-CN-AH-2 11.42 263.71 220.50 0.84 3-CN-AH-3 21.66 239.83 205.60 0.86 3-CN-AH-4 32.38 251.17 209.20 0.83 3-COO-AH-1 5.91 429.05 437.50 1.02 3-COO-AH-2 9.26 424.36 362.60 0.85 3-COO-AH-3 13.30 438.49 327.60 0.75 3-COO-AH-4 20.93 451.13 183.75 0.41 注:已知硫酸-蒽酮法计算得到的是多糖化学浓度,在此以多糖质量浓度A表示;而速率比浊法检测得到的是多糖免疫学浓度,在此以多糖质量浓度B表示。硫酸-蒽酮法标准曲线R2=0.998;速率比浊法标准曲线R2=0.996。2.5 结合物制备及免疫原性检测
【参考文献】：
期刊论文
[1]中国内地儿童侵袭型肺炎链球菌感染血清型的分布特征[J]. 苏楠,韩星,杨怿墨,林江涛. 中华医学杂志. 2016 (18)
[2]2010—2011年中国肺炎链球菌耐药性和血清型研究[J]. 王启,张菲菲,赵春江,陈宏斌,王占伟,郭宇,李荷楠,王辉. 中华结核和呼吸杂志. 2013 (02)
本文编号：3374812
【文章来源】：微生物学免疫学进展. 2020,48(01)
【文章页数】：9 页
【部分图文】：
3型多糖重复单位结构
表2 不同碳二亚胺比例对多糖羧基活化度的影响实验结果Tab.2 The effect to derivatives from carboxyl group activated with different degree of EDC 编号 碳二亚胺/(mmol/L) 活化度/% Mw/(g/mol) (质量比) (摩尔比) 3-COO-AH-1 5 5.91 10 0.87×105 3-COO-AH-2 10 9.26 16 1.08×105 3-COO-AH-3 20 13.30 23 1.33×105 3-COO-AH-4 50 20.93 36 4.51×1052.3 多糖及衍化物等电点分析
表4 不同基团活化度对多糖抗原性的影响实验结果Tab.4 The effect to antigenicity for derivatives from activated chemical groups activated with different degree 编号 活化度/% 多糖质量浓度A/(μg/mL) 多糖质量浓度B/(μg/mL) 多糖单位抗原值(B/A) 参考多糖 0.00 1 000.00 1 000.00 1.00 3-CN-AH-1 7.49 275.84 236.00 0.86 3-CN-AH-2 11.42 263.71 220.50 0.84 3-CN-AH-3 21.66 239.83 205.60 0.86 3-CN-AH-4 32.38 251.17 209.20 0.83 3-COO-AH-1 5.91 429.05 437.50 1.02 3-COO-AH-2 9.26 424.36 362.60 0.85 3-COO-AH-3 13.30 438.49 327.60 0.75 3-COO-AH-4 20.93 451.13 183.75 0.41 注:已知硫酸-蒽酮法计算得到的是多糖化学浓度,在此以多糖质量浓度A表示;而速率比浊法检测得到的是多糖免疫学浓度,在此以多糖质量浓度B表示。硫酸-蒽酮法标准曲线R2=0.998;速率比浊法标准曲线R2=0.996。2.5 结合物制备及免疫原性检测
【参考文献】：
期刊论文
[1]中国内地儿童侵袭型肺炎链球菌感染血清型的分布特征[J]. 苏楠,韩星,杨怿墨,林江涛. 中华医学杂志. 2016 (18)
[2]2010—2011年中国肺炎链球菌耐药性和血清型研究[J]. 王启,张菲菲,赵春江,陈宏斌,王占伟,郭宇,李荷楠,王辉. 中华结核和呼吸杂志. 2013 (02)
本文编号：3374812
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