针对结核分枝杆菌潜伏感染的DNA疫苗V569免疫原性及保护性的初步研究

发布时间：2021-09-22 00:04

　　为研究针对结核分枝杆菌潜伏感染的DNA疫苗,基于质粒A39构建了p-VAX1-Ag85B-Rv3425-Rv2029c-PPE26 （V569）质粒DNA,并对其免疫原性及保护性进行初步研究。免疫性评价试验共分6组:PBS、p-VAX1-Ag85B（A）、p-VAX1-Ag85B-Rv3425（A3）、A39、V569和BCG,采用左后腿肌内注射C57BL/6小鼠,用流式细胞术和酶联免疫吸附试验（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）分别检测细胞免疫和体液免疫水平;构建斑马鱼-海分枝杆菌潜伏感染模型,将PBS、A、A3、A39、BCG、V569分别通过腹腔注射免疫斑马鱼后,每日注射地塞米松10ug诱导海分枝杆菌复发感染,对斑马鱼肝脏进行菌落计数并绘制生存曲线。结果显示,与BCG组相比,V569能引发实验小鼠强烈的细胞免疫反应（IFN-γ高水平分泌）,外周血CD4⁺/CD8⁺ T细胞比例明显增加。在斑马鱼-海分枝杆菌潜伏感染复发模型中,与BCG免疫组相比,V569免疫斑马鱼后可显著减少其肝脏中海分枝杆菌... 

【文章来源】：微生物与感染. 2019,14(05)

【文章页数】：8 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 V569质粒的构建
        1.2.2 重组质粒转染HEK293T细胞验证质粒编码蛋白在真核细胞的表达
        1.2.3 小鼠免疫
        1.2.4 流式细胞术检测眼球外周血CD4+T细胞和CD8+T细胞
        1.2.5 脾淋巴细胞分离和培养
        1.2.6 ELISA检测脾淋巴细胞上清液中IFN-γ、IL-4的水平
        1.2.7 斑马鱼潜伏感染模型的构建
        1.2.8 斑马鱼脏器菌落计数
        1.2.9 统计学分析
2 结果
    2.1 重组质粒DNA编码蛋白可在转染HEK293T细胞表达
    2.2 质粒V569免疫小鼠可以促进外周血CD4+、CD8+T细胞的增殖
    2.3 V569免疫可促进IFN-γ的分泌
    2.4 质粒V569可抑制斑马鱼-海分枝杆菌潜伏感染复发
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]针对潜伏结核感染的A39 DNA疫苗构建及其免疫原性研究[J]. 宋娜,李光华,黄琪,孔聪,王洪海,徐颖.  微生物与感染. 2015(01)



本文编号：3402755