含小鼠FcγRⅡb基因慢病毒载体对MRL/lpr SLE小鼠的作用研究

发布时间：2021-09-30 03:49

　　目的 包装含小鼠FcγRⅡB慢病毒表达载体,观察其在小鼠B细胞表面的表达并研究其抑制性受体对MRL/lpr SLE小鼠的作用研究。方法 将慢病毒表达重组质粒TRE-FcγRⅡB、慢病毒调节质粒Tet分别与慢病毒包装质粒共转染HEK293T细胞,分别包装表达病毒和调节病毒,分别测定表达病毒和调节病毒感染滴度。将MRL/lpr SLE小鼠预防动物（周龄8周左右）40只随机分成病毒液100ul组、病毒液200ul组、预防空病毒组（不含FcγRIIb基因）、预防对照组（生理盐水组）四组,每组10只,再将模型动物（周龄16周左右）组40只随机分成病毒100ul组、200ul组、治疗空病毒组（不含FcγRIIb基因）和治疗对照组（生理盐水组）,每组10只。通过尾静脉注射将病毒液转导到MRL/lpr SLE小鼠体内,连续注射四周,每周一次。注射完成后,观察二周后提尾反射法收集小鼠尿液检测小鼠尿蛋白,眼眶內眦静脉取血约500μL后检测小鼠抗核抗体和抗双链DNA含量,取血完成后处死小鼠,取各组小鼠新鲜脾脏组织进行研磨、淋巴细胞分离后再磁珠分选检测B细胞上FcγRIIb基因的mRNA和蛋白的表达并做肾脏、... 

【文章来源】：宁夏医科大学宁夏回族自治区

【文章页数】：57 页

【学位级别】：硕士

【图文】：

重组质粒鉴定图

分别与 TRE 质粒大小和 FcγRⅡB 基因片段大小一致（图 2）。测序鉴示插入片段碱基序列与 GenBank 提供 FcγRⅡB 碱基序列同源性 100%

图１：体外转导 B 细胞图，（200×）LE 小鼠抗核抗体的变化 A、图 C 与图 D 相比抗核抗体含量明显较减少，p<0.05,MRL/lpr SLE 小鼠抗核抗体的变化结果图图 C组抗核抗体含量，荧光数 3200的抗核抗体含量，荧光数 1400图 C 治疗对照组的抗核抗体含图Ｄ治疗病毒组的抗核抗体含


本文编号：3415066