人肠道病毒D68型反向遗传系统的建立与应用
发布时间：2021-10-07 21:20
人肠道病毒D68型（Human enterovirus D68,EV-D68）属于小RNA病毒科、肠道病毒属。1962年,EV-D68在美国加利福尼亚州患有严重呼吸道感染的儿童鼻咽拭子中首次被发现,EV-D68可在儿童中引起严重的呼吸系统疾病,严重患者会出现急性弛缓性瘫痪等神经系统疾病,甚至导致死亡。近年来,EV-D68在全球各地频繁暴发。2014年,在美国发生了迄今为止规模最大的EV-D68感染,确诊病例1153例,死亡14例。然而目前对于EV-D68的研究较少,并且缺少特效的疫苗和有效的治疗手段来应对EV-D68感染。因此,对EV-D68进行分子生物学、复制机制和致病机理等深入的研究显得极为重要。利用反向遗传学技术可以在DNA水平对RNA病毒进行改造,从而研究RNA病毒基因组的结构与功能,为病毒的复制机制以及致病机理提供了方法。本研究构建了EV-D68 Fermon病毒株的反向遗传操作系统,包括EV-D68微复制子和EV-D68感染性克隆。微复制子是利用萤火虫荧光素酶报告基因替换EV-D68基因组编码区构建而成,并分别利用T7 RNA聚合酶和人RNA聚合酶I（Pol I）拯救微复制...
【文章来源】：天津大学天津市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：77 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
EV-D68基因组结构
图 3-2 EV-D68 微复制子片段扩增产物电泳结果ectropheresis of PCR product amplified with EV-D68 minirepliTR和FLuc-3’UTR为模板，以5’UTR-F1/R3为引物进plicon片段，PCR产物大小约为2500bp。PCR扩增结图 3-3 EV-D68 微复制子片段重叠 PCR 电泳结果Fig.3-3 Electropheresis of overlapping PCR product
3’端插入 3’UTR 和 Poly(A)尾，获得 FLuc-3’UCR 扩增结果见图 3-2。图 3-2 EV-D68 微复制子片段扩增产物电泳结果tropheresis of PCR product amplified with EV-D68 minireR和FLuc-3’UTR为模板，以5’UTR-F1/R3为引物licon片段，PCR产物大小约为2500bp。PCR扩增
【参考文献】：
期刊论文
[1]肠道病毒71型（EV71）荧光病毒的构建[J]. 朱守海,王璐璐. 生物技术通报. 2014(07)
本文编号：3422790
【文章来源】：天津大学天津市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：77 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
EV-D68基因组结构
图 3-2 EV-D68 微复制子片段扩增产物电泳结果ectropheresis of PCR product amplified with EV-D68 minirepliTR和FLuc-3’UTR为模板，以5’UTR-F1/R3为引物进plicon片段，PCR产物大小约为2500bp。PCR扩增结图 3-3 EV-D68 微复制子片段重叠 PCR 电泳结果Fig.3-3 Electropheresis of overlapping PCR product
3’端插入 3’UTR 和 Poly(A)尾，获得 FLuc-3’UCR 扩增结果见图 3-2。图 3-2 EV-D68 微复制子片段扩增产物电泳结果tropheresis of PCR product amplified with EV-D68 minireR和FLuc-3’UTR为模板，以5’UTR-F1/R3为引物licon片段，PCR产物大小约为2500bp。PCR扩增
【参考文献】：
期刊论文
[1]肠道病毒71型（EV71）荧光病毒的构建[J]. 朱守海,王璐璐. 生物技术通报. 2014(07)
本文编号：3422790
本文链接：https://www.wllwen.com/xiyixuelunwen/3422790.html
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