大鼠心脏移植模型中mTORC1/C2信号通路在消除慢性排斥反应中的作用

发布时间：2021-10-11 03:24

　　[目的]探索并寻找一种可应用于临床的靶向治疗方法,来抑制移植器官的慢性排斥反应。尽管临床器官移植应用的免疫抑制剂已经取得了令人注目的进展,但仍不能逆转慢性排斥反应,而这恰恰是移植器官长期存活的关键。因此,目前移植领域相关研究的一个重要目标就是阻断慢性排斥,同时避免全身免疫抑制的副作用。本实验室建立了大鼠腹腔异位心脏移植模型来研究慢性排斥反应阻断机制,发现阻断慢性排斥是T细胞浸润受到显著抑制,而T细胞浸润是细胞骨架肌动蛋白推动T细胞向移植物内迁移的过程[1-9]。我们最近的研究显示阻断慢性排斥反应需要在移植术后早期（1-7天）实施阻断,其导致了细胞骨架肌动蛋白结构发生了显著变化,而参与构建肌动蛋白和抗原递呈细胞的囊泡运输的Rho-GTP酶通路的分子下调。这些发现说明阻断慢性排斥反应需要通过干扰Rho-GTP酶信号通路来破坏T细胞的细胞骨架肌动蛋白的完整性和抗原递呈通路来实现,而这一研究将开创以Rho-GTP酶信号通路为靶向的免疫抑制治疗的新方向。近期的研究显示哺乳动物雷帕霉素靶标（mammalian target of rapamycin,mTOR）激酶复合体1和2（雷帕霉素敏感的复合体... 

【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校

【文章页数】：107 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
中文摘要
Abstract
缩略语/符号说明
前言
    研究现状、成果
    研究目的、方法
一、动物试验—大鼠异位腹腔心脏移植模型的建立
    1.1 材料和方法
        1.1.1 主要仪器设备及实验材料
        1.1.2 试验动物
        1.1.3 动物模型建立
            1.1.3.1 动物分组
            1.1.3.2 异位心脏移植手术
            1.1.3.3 术后观察及处理
            1.1.3.4 受体脏器切取
    1.2 结果
    1.3 讨论
        1.3.1 手术方法
        1.3.2 麻醉方法的选择
        1.3.3 控制冷热缺血时间
        1.3.4 减少出血
        1.3.5 术后处理
        1.3.6 影响手术成败的因素
        1.3.7 术后大体形态和镜下病理变化
    1.4 结论
二、mTOR复合体C1与C2及下游RAC1与免疫耐受的关系
    2.1 材料与方法
        2.1.1 试验器材与试剂
        2.1.2 试剂配制
        2.1.3 试验技术及操作过程
            2.1.3.1 从脾中提取T细胞并从T细胞提取蛋白
            2.1.3.2 样品蛋白浓度测定
            2.1.3.3 Western Blot
            2.1.3.4 Reblot
            2.1.3.5 免疫染色及免疫双染色
        2.1.4 数据统计
    2.2 结果
        2.2.1 Western Blot
        2.2.2 Western Blot数据统计
            2.2.2.1 mTOR表达
            2.2.2.2 RAPTOR表达
            2.2.2.3 PRAS40表达
            2.2.2.4 GBL表达
            2.2.2.5 DEPTOR的表达
            2.2.2.6 SIN的表达
            2.2.2.7 RICTOR的表达
            2.2.2.8 RAC 1的表达
        2.2.3 免疫染色及免疫双染色
            2.2.3.1 mTOR与ER免疫共染色结果
            2.2.3.2 mTOR与高尔基体免疫共染色结果
            2.2.3.3 RAC1与mTOR免疫共染色结果
    2.3 讨论
        2.3.1 Mtor
        2.3.2 mTOR复合物
        2.3.3 mTOR信号通路
        2.3.4 mTOR下游
        2.3.5 mTOR信号通路在细胞中重新分布
    2.4 结论
三、Y-27632抑制大鼠心脏移植慢性排斥反应
    3.1 材料和方法
        3.1.1 主要仪器设备及试验材料
        3.1.2 试验动物
        3.1.3 动物模型建立
            3.1.3.1 动物分组
            3.1.3.2 异位心脏移植手术
            3.1.3.3 术后观察及处理
            3.1.3.4 受体脏器切取
        3.1.4 标本
        3.1.5 统计分析
    3.2. 结果
        3.2.1 HE染色
        3.2.2 VVG/Trichrome染色
    3.3 讨论
    3.4 小结
全文结论
论文创新点
参考文献
发表论文和参加科研情况说明
综述(一)
    参考文献
综述(二)
    参考文献
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]两种大鼠心脏移植模型的制作比较[J]. 王晓亮,彭志海.  实验动物科学. 2008(06)
[2]大鼠异位心脏移植模型的术式探讨[J]. 马毅,陈细桃,朱晓峰,何晓顺,陈规划.  中华实验外科杂志. 2005(10)
[3]大鼠异位心脏移植动物模型制作的外科技巧[J]. 高旭辉,王昊飞,王武军,邹小明.  实用医学杂志. 2004(05)



本文编号：3429692