秋水仙碱通过阻断IL-1β/IL-6抑制大鼠无菌性心包炎模型心房颤动的发生

发布时间：2021-10-20 08:37

　　目的:秋水仙碱作为一种特殊的抗炎药物,能有效的预防术后房颤的发生,然而其机制尚不明确。因此本课题拟构建大鼠无菌性心包炎（SP）模型,研究秋水仙碱对无菌性心包炎术后房颤发生的影响及其机制。方法:在SD大鼠心房表面均匀播撒无菌性滑石粉,建立大鼠无菌性心包炎模型,应用食道心房调博技术检测房颤诱发率和房颤持续时间。MPO染色检测中性粒细胞浸润,Real Time PCR检测各组炎症和纤维化相关指标。Elisa检测IL-1β和IL-6的蛋白水平,Masson染色检测胶原含量,免疫组化染色检测α-SMA表达。Western Blot检测P38、AKT、GSK3β、STAT3等相关信号通路蛋白表达。此外,分离培养成年大鼠心肌成纤维细胞,给予IL-1β刺激或者秋水仙碱和IL-1β共同刺激后,采用Real Time PCR检测各组细胞IL-6分泌情况,Western Blot检测信号分子的表达。结果:与对照组相比,SP术后房颤诱发率和房颤持续时间明显延长。心房中性粒细胞浸润数明显增加;心房组织中IL-1β、IL-6、TNF-α、TGF-β在mRNA水平上表达上调,而IL-1β和IL-6的蛋白表达也呈现时... 

【文章来源】：厦门大学福建省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：70 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１：秋水仙碱能够浓度依赖的抑制ＳＰ大鼠房颤发生?Ａ、食道心房调博??技术记录到的代表性正常大鼠体表心电图（ＡＶＲ、ＩＩ）食道心电图（Ｅｓｏ）代表??性图片

症反应在房颤的发生发展中起到重要作用。为了进一步探究秋水仙碱的具体机制，??我们检测了?Ｓｈａｍ组、Ｖｅｈｉｃｌｅ组和Ｃｏｌｃｈ组大鼠心房组织中的炎症反应情况。如??图２所示，Ａ图为三组大鼠心房组织的典型的ＭＰＯ染色结果，Ｂ图为ＭＰＯ染??色的统计结果，Ｖｅｈｉｃｌｅ组（７０８．０±４１．８）大鼠心房局部中性粒细胞浸润显著高于??Ｓｈａｍ组（１．２?±０．５），而与Ｖｅｈｉｃｌｅ组相比，Ｃｏｌｃｈ组中性粒细胞的浸润降低了??５７．３％?（３０２．５±４１．８，?Ｐ０．００１），说明秋水仙碱抑制了中性粒细胞在心房局部的??浸润。图?Ｃ?为?Ｒｅａｌ?Ｔｉｍｅ?ＰＣＲ?结果，Ｖｅｈｉｃｌｅ?组心房?ＩＬ－ｌｐ、ＩＬ－６、ＴＮＦ－ａ、ＴＧＦ－Ｐ??表达较Ｓｈａｍ组显著上调，而Ｃｏｌｃｈ组ＩＬ－６、ＴＮＦ－ａ、ＴＧＦ－ｐ明显降低。其中对??ＩＬ－６的作用效果最为显著，Ｖｅｈｉｃｌｅ组（１４．２±３．０）较Ｓｈａｍ组（２．２±１．１）增加了??７倍，而Ｃｏｌｃｈ组（３．９±１．６）较Ｖｅｈｉｃｌｅ组降低了?７２．５％。近年来相关临床研究??结果显示ＩＬ－６可以作为独立预测房颤发生的危险因子

为了进一步研究秋水仙碱预防无菌性心包炎术后房颤发生的具体分子机制，??我们将Ｓｈａｍ组、Ｖｅｈｉｃｌｅ组和Ｃｏｌｃｈ组大鼠的心房组织提取全蛋白，采用Ｗｅｓｔｅｒｎ??Ｂｌｏｔ技术检测心房局部相关信号分子的表达情况。如图４所示，Ａ图是依次是??ＳＴＡＴ３、Ｐ３８、ＧＳＫ３ｐ、ＡＫＴ、ＪＮＫ、ＥＲＫ?信号通路蛋白的典型?Ｗｅｓｔｅｒｎ?Ｂｌｏｔ?图??片，Ｂ图为其统计结果。与Ｓｈａｍ组相比，Ｖｅｈｉｃｌｅ组大鼠心房组织中Ｓｈａｍ组ＶＳ??Ｖｅｈｉｃｌｅ?组：Ｐ－ＳＴＡＴ３／ＳＴＡＴ３?（１．２７±０＿２１?ＶＳ?１０．３９±０．６９，?Ｐ＜０．００１）、??Ｐ－ＧＳＫ３ｐ／ＧＳＫ３ｐ?（０．７６＋０．１２?ＶＳ?１．４１＋０．１０，Ｐ＜０．０５）?．?Ｐ－Ｐ３８／Ｐ３８?（０．７０＋０．１５?ＶＳ??１．５４±０．２６，Ｐ＜０．０５）?Ｐ－ＡＫＴ／ＡＫＴ?（０．８２±０．１２?ＶＳ?１．５１?土０．１７，Ｐ＜０．０１）表达显著增加，??而Ｃｏｌｃｈ组以上蛋白表达相应降低，Ｖｅｈｉｃｌｅ组ＶＳ?Ｃｏｌｃｈ组：??Ｐ－ＳＴＡＴ３／ＳＴＡＴ３（１０．３９±０．６９?ＶＳ?２．９７±０．６６?Ｐ＜０．００１），?Ｐ－ＧＳＫ３ｐ／ＧＳＫ３ｐ（１．４１±０．１０??ＶＳ?０．４９＋０．０７；?Ｐ＜０．０１）＞Ｐ－Ｐ３８／Ｐ３８（１．５４±０．２６?ＶＳ?０．５５±０．０５；?Ｐ＜０．０５）＾?Ｐ－ＡＫＴ／ＡＫＴ??（１．５１±０．１７ＶＳ?０．８０５±０．１０２；?Ｐ＜０．０１）。而?Ｐ－ＪＮＫ／ＪＮＫ?和?Ｐ－ＥＲＫ／ＥＲＫ?表达量在??三组之间无统计学差异

【参考文献】：
期刊论文
[1]白介素-6及其受体与心血管系统的研究进展[J]. 刘晓柳,李光千.  细胞与分子免疫学杂志. 2009(02)
[2]白介素1信号转导研究进展[J]. 郭甫坤,吴曙光.  国外医学(分子生物学分册). 2001(01)



本文编号：3446592