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Espin与whirlin相互作用机制的研究

发布时间:2021-11-01 23:47
  Usher综合症会导致眼盲和耳聋,是视力和听力方面最常见的基因疾病。其中Ⅱ型(USH2)患者表现为先天性中重度的听力受损和正常的前庭反应,是发病最多的类型,也是备受关注的研究热点。Usher综合症Ⅱ型有三个已确认的相关蛋白:usherin、GPR98(G protein-couple receptor 98)以及whirlin,它们在体内会形成USH2蛋白复合体,当某个蛋白出现问题不能形成复合体就会导致USH2的发病。其中,usherin和GPR98蛋白的大部分在细胞膜外,C端均有一个PDZ结合结构域(PBM)。whirlin是一种支架蛋白,包含3个PDZ结构域和一个脯氨酸富集区(PR),whirlin在细胞内起到一个连接USH2蛋白复合体的作用,是构成USH2蛋白复合体的必要组成部分,所以与whirlin能相互作用的蛋白常被认为有可能是USH2蛋白复合体的成员。研究表明,espin与whirlin都分布于感觉细胞的微绒毛中,并且在体外可以相互作用,但是espin与whirlin相互作用的机制尚不清楚。本文构建了两个能够表达whirlin蛋白N端和C端的重组载体,其中N端片段包含前两个... 

【文章来源】:吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】:74 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
摘要
abstract
第一章 前言
    1 Usher综合症概述
    2 USH2概述
        2.1 USH2基因
        2.2 USH2蛋白的亚细胞定位
        2.3 USH2蛋白复合体和与其存在相互作用的蛋白
        2.4 USH2复合体的功能和USH2的发病机制
        2.5 USH2的治疗研究
    3 Espin简介
        3.1 Espin的结构与活性
        3.2 耳聋和人类espin基因突变
    4 研究的目的及意义
第二章 材料与方法
    1 实验材料
        1.1 试剂和试剂盒
        1.2 菌株、载体和细胞
        1.3 仪器设备
        1.4 实验试剂的配制
    2 实验方法
        2.1 whirlin片段的重组质粒的构建
        2.2 Whirlin片段与espin在细胞中共定位
        2.3 Whirlin片段与espin的相互作用
第三章 结果
    1 Whirlin片段重组质粒的构建
        1.1 pEGFP-C1-whirlin-N载体的鉴定
        1.2 pEGFP-C1-whirlin-C载体的鉴定
        1.3 小结
    2 Whirlin片段与espin在细胞中定位
        2.1 Whirlin-N端与espin在细胞中共定位
        2.2 Whirlin-C端与espin在细胞中无共定位
        2.3 小结
    3 Whirlin与espin之间的相互作用
        3.1 Whirlin结合不与actin结合的espin
        3.2 whirlin-N端与espin相互作用
第四章 讨论
参考文献
致谢



本文编号:3470920

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