PLA 2 /LPC途径在肝细胞脂性凋亡中的机制研究

发布时间：2021-11-02 06:27

　　目的探讨PLA2/LPC途径在FFAs致肝细胞脂性凋亡中的作用及分子机制。方法常规培养张氏肝细胞,采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法观察饱和脂肪酸（棕榈酸,PA）和PLA2抑制剂作用18小时后细胞的增殖情况,用Hoechst33258染色和AnnexinV-PI染色流式细胞术检测细胞凋亡；尼罗红染色检测细胞内脂质含量；分别运用荧光定量PCR及Western-blot方法在mRNA水平及蛋白水平检测三种PLA2亚型（sPLA2、cPLA2、iPLA2）的表达,用生化反应酶法检测细胞中裂解液中LPC水平。结果PA干预后的肝细胞细胞增殖抑制率随PA作用时间延长、浓度增加而进行性增加,细胞凋亡明显增加（P<0.05）；尼罗红染色显示PA并未引起细胞内大量脂肪蓄积；PA诱导过程中,三种PLA2亚型表达明显增加；且PA干预后肝细胞内LPC含量增加。iPLA2特异性抑制剂（BEL）,cPLA2特异性抑制剂（AACOCF3）和sPLA2抑制剂（sPLA2-IIA InhibitorⅠ）分别与PA共孵育18小时后,细胞活性,细胞凋亡率较PA单独孵育明显改善。BEL、sPLA2-IIA Inhibito... 

【文章来源】：浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：62 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

饱和脂肪酸(棕桐酸)对肝细胞活性的影响

050100200300400600COr训二sntr日 tionOfpA图1一1饱和脂肪酸(棕桐酸)对肝细胞活性的影响(2)不饱和脂肪酸(油酸)对肝细胞株细胞活性的影响肝细胞与不同浓度油酸共同孵育12、18、24小时后，油酸处理组肝细胞活性与正常对照组相比未见明显改变。120100-闷卜-12怡 ~18hs24怡一一一谈 42680000岁一一乃者.不鉴一O 050100200300400600COnCe汉r日廿 OnOfOA图1一2不饱和脂肪酸(油酸)对肝细胞活性的影响

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【参考文献】：
期刊论文
[1]肥胖儿童血清脂联素水平与非酒精性脂肪性肝病的关系[J]. 方燕兰,梁黎,邹朝春,洪芳,傅君芬.  中华肝脏病杂志. 2006(10)
[2]中重度肥胖青少年的常见并发症[J]. 朱建芳,梁黎,王春林,邹朝春.  实用儿科临床杂志. 2006(19)
[3]肥胖儿童非酒精性脂肪肝炎发病状况及机制探讨[J]. 傅君芬,梁黎,王春林,洪芳,董关萍,李筠.  浙江大学学报(医学版). 2006(01)
[4]高浓度游离脂肪酸对胰岛细胞凋亡及相关基因表达的影响[J]. 何庆,王保平,刘铭,苏京,王晶,陈克勤,尹潍.  天津医药. 2004(05)
[5]脂联素与幼兔非酒精性脂肪性肝病的相关性[J]. 方燕兰,梁黎,傅君芬.  中华肝脏病杂志. 2007 (04)



本文编号：3471510