KLF2调控Nrf2/Bach1在CSE诱导的大鼠气道上皮细胞氧化与抗氧化机制中的作用

发布时间：2021-11-08 04:49

　　【目的】研究Klf2及Nrf2/Bach1在经CSE刺激的大鼠气道上皮细胞中的表达，明确其感受氧化应激对靶基因γ-GCS的调控作用；探讨CSE对气道上皮细胞凋亡的影响，及其与氧化抗氧化反应之间的关系；观察KLF2质粒转染细胞后分别对Nrf2、Bach1和γ-GCS表达水平的影响。【方法】实验分为两部分。（1）不转染质粒的细胞部分：采用酶消化法提取大鼠原代气管-支气管上皮细胞，噻唑蓝（MTT）比色法测定10%香烟烟雾提取物（cigarette smoke extract，CSE）在不同时间点作用于细胞后对细胞增殖的影响；选取6小时时间点用Hoechst染色观察细胞形态变化；并检测该时间点细胞活性氧ROS含量；用双酶法检测γ-GCS活性；通过免疫细胞化学法观察Nrf2/Bach1的核转位；Western blot、RT-PCR技术研究细胞中Klf2、Nrf2、Bach1、γ-GCS的蛋白及mRNA表达。（2）转染质粒的细胞部分：给予Klf2质粒转染细胞使之基因过表达，用Western blot、RT-PCR法观察细胞中Klf2、Nrf2、Bach1、γ-GCS的蛋白及mRNA表达变化。【结... 

【文章来源】：南华大学湖南省

【文章页数】：57 页

【学位级别】：硕士

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本文编号：3483035