家蝇三龄幼虫Mdctl基因原核表达及生物信息学分析

发布时间：2021-11-26 14:59

　　目的:构建家蝇C型凝集素基因（Mdctl）原核表达体系,对Mdctl基因及编码蛋白进行生物信息学分析。方法:采用生物信息学方法,分析Mdctl基因及编码蛋白;将构建的pET28a（+）/Mdctl重组表达质粒转化至大肠杆菌BL21-DE3中,以异丙基硫代半乳糖苷（IPTG）诱导表达重组蛋白并通过SDS-PAGE对表达产物进行分析;Ni-IDA法纯化重组蛋白,Western-Blot对其鉴定。结果:生物信息学分析显示,Mdctl基因开放阅读框全长333 bp,共编码110个氨基酸,理论分子量为1313 kDa,等电点为449,信号肽位于1～22位氨基酸之间;Mdctl蛋白中存在Clect结构域,属于C型凝集素超家族;Mdctl重组蛋白在大肠杆菌BL21-DE3中主要以包涵体形式表达,重组蛋白的相对分子质量与Mdctl蛋白两端融合6×His标签后的总分子量相一致。结论:成功构建Mdctl原核表达系统,并获得重组蛋白。 

【文章来源】：贵州医科大学学报. 2020,45(02)

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

总RNA的琼脂糖凝胶电泳

pMD19-T/Mdctl重组菌落PCR的琼脂糖凝胶电泳

Mdctl纯化蛋白的鉴定

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3520389