人胎盘间充质干细胞移植能够修复自身免疫性卵巢早衰小鼠卵巢功能

发布时间：2021-12-31 10:27

　　一、hPMSCs移植修复自身免疫性卵巢早衰小鼠卵巢功能作用及其与Treg细胞及TGF-β、IFN-γ的关系目的:检测人胎盘间充质干细胞（human placenta-derived mesenchymal stem cells,hPMSCs）移植对自身免疫性卵巢早衰（premature ovarian failure,POF）小鼠卵巢功能的修复作用,并探讨该修复功能与调节性T细胞（regulatory T cells,Treg cells）及转录生长因子 β（transforming growth factor β,TGF-β）、干扰素 γ（interferon γ,IFN-γ）的关系。方法:利用小鼠透明带多肽3（zona pellucida glycoprotein 3,ZP3）建立自身免疫性卵巢早衰小鼠模型,通过酶联检测（enzyme linked immunosorbent assay,ELIS A）定性检测小鼠血清抗透明带抗体（Anti-zona pellucida antibody,AZPAb）筛选小鼠后,部分给予尾静脉注射hPMSCs悬液处理。通过HE染色（histopat... 

【文章来源】：滨州医学院山东省

【文章页数】：61 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１－１?ｈＰＭＳＣｓ表型及分化鉴定（Ａ）绿色直方图代表同型对照染色；蓝色直方图代表细??胞表面特殊标记表达

ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ．?Ｄａｔａ?ａｒｅ?ｐｒｅｓｅｎｔｅｄ?ａｓ?ｍｅａｎ?±?ＳＤ．??１．３．４移植前后小鼠卵巢组织形态变化??正常小鼠卵巢包含大量各级卵泡，包括原始卵泡（图１－３?（Ａ－ａ）），初级??卵泡（图１－３?（Ａ－ｂ）），次级卵泡（图１－３?（Ａ－ｃ））及闭锁卵泡（图１－３?（Ａ－ｄ））；??经ＺＰ３处理后，小鼠卵巢萎缩、间质纤维化（图３Ｂ），生长卵泡（尤其是窦??性卵泡）显著减少（图１－３１）。经ｈＰＭＳＣｓ移植处理后，小鼠卵巢中初级卵泡??数（１２．８０±４．２１）及次级卵泡数（６．１３±２．１７）较?ＰＯＦ?组（４．６３±０．９２?及?３．８０±０．８４）??均显著增加（Ｐ＜０．０５），同时，卵巢组织可见大量血管增生，可能是由于干细??胞治疗引起血管生成及抑制凋亡作用［３９］，增加的血流有助于卵巢功能恢复。??１３??

２．３．２?ＧＣｓ培养及鉴定??倒置相差显微镜观察结果显示：分离的卵巢ＧＣｓ培养２４?ｈ后，呈梭形或??多角形不规则、贴壁样生长（图２－１Ａ）。培养５?ｄ可长满皿底。采用ＧＣｓ特异??性抗体（ＦＳＨＲ抗体）免疫荧光染色鉴定ＧＣｓ，结果显示：培养的细胞中有??ＦＳＨＲ阳性表达，且染色主要定位于细胞质（图２－１?（Ｂ－Ｄ））。??＿＿８Ｍ??图２－１?ＧＣｓ形态及鉴定。ＧＣｓ为梭形或多角形形态（图Ａ，ｘ２〇〇）；?ＤＡＰＩ染色（蓝??色荧光）代表ＧＣｓ核（图Ｂ，?ｘ４００）；?Ｄｙｌｉｇｈｔ?５４９?（红色荧光）代表细胞质中ＦＳＨＲ阳??性表达（图Ｃ，?ＭＯＯ）；双染色（蓝色及红色）定位显示ＧＣｓ细胞上ＦＳＨＲ表达（图Ｄ，??ｘ４００）〇??Ｆ；ｉｇｕｒｅ?２－１．?Ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ?ａｎｄ?ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆ?ＧＣｓ?（Ａ－Ｄ）．?ＧＣｓ?ｗｅｒｅ?ｓｈｏｗｎ?ａｓ?ｓｐｉｎｄｌｅ－ｓｈａｐｅｄ??ｏｒ?ｐｏｌｙｇｏｎ?ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ?（Ａ，?ｘ２００）．?ＤＡＰ１?ｓｔａｉｎｉｎｇ?（ｂｌｕｅ?ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ）?ｉｎｄｉｃａｔｅｓ?ｔｈｅ?ＧＣｓ??ｎｕｃｌｅｕｓ?（Ｂ，?＞＜４００）．?ＦＳＩ?ＩＲ－ｐｏｓｉｔｉｖｅ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｗｅｒｅ?ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ?ｕｎｄｅｒ?Ｄｙｌｉｇｈｔ?５４９?（ｒｅｄ??ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ）（Ｃ

【参考文献】：
期刊论文
[1]针刺治疗对卵巢早衰大鼠PI3K/Akt/mTOR信号通路的影响[J]. 张毅敏,于斌,陈佳,赵志生,王嘉丽,黄法森,林月娥,王梦薇,张玉佩,魏波.  中国针灸. 2015(01)
[2]卵泡刺激素促进卵巢颗粒细胞增殖分化的信号通路的研究进展[J]. 李晓雯,郎朗,季宇彬,王冰冰,赵春丽.  北京联合大学学报(自然科学版). 2012(04)
[3]PKH26标记的人脐带间充质干细胞在大鼠化疗性卵巢早衰模型中的卵巢迁移[J]. 朱少芳,何援利,付霞菲,卓光生.  现代妇产科进展. 2011(02)



本文编号：3560094