载脂蛋白M对内皮型一氧化氮合酶表达及磷酸化的影响

发布时间：2022-02-13 18:41

　　目的:越来越多的研究表明载脂蛋白M（apoM）作为高密度脂蛋白（HDL）的组成成分及1-磷酸鞘氨醇（S1P）的生理性载体广泛地参与了体内众多的病理生理过程。apoM与内皮保护作用及机体炎症反应密切相关。内皮型一氧化氮合酶（eNOS）主要存在于内皮细胞中,与内皮细胞的炎症、血管的舒缩以及血小板粘附聚集等生物过程紧密相关。本研究旨在探究apoM是否通过介导eNOS表达水平及其活性的变化参与机体的病理生理过程。方法:（1）用空载慢病毒和携带apoM基因的慢病毒转染人脐静脉细胞与肺腺癌细胞A549的融合细胞株EA.hy926细胞,获得稳定表达的空载慢病毒转染的EA.hy926细胞(apoM^TgN)和携带apoM基因的慢病毒转染的EA.hy926细胞(apoM^Tg),待细胞生长至70%⁸0%的时候,换用1%的BSA继续培养细胞12小时后用浓度为10ng/ml的肿瘤坏死因子-α（TNF-α）分别处理上述细胞12小时,收集细胞并提取细胞总RNA,检测细胞eNOS mRNA的表达水平,比较分析apoM对eNOS表达水平的影响。（2）随机... 

【文章来源】：苏州大学江苏省211工程院校

【文章页数】：51 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

apoM慢病毒转染EA.926细胞的效率

图 2. 过表达 apoM 对 TNF-α 诱导的 EA.hy926 细胞 eNOS mRNA 表达水平的影响3. apoM+/+小鼠及 apoM-/-小鼠在正常情况下及 LPS 诱导的炎症情况下对 eNOSmRNA 表达水平的影响如图所示，apoM+/+小鼠与相应对照组的 apoM-/-小鼠肾脏的 eNOS mRNA 的表达相比无差异。采用 10mg/kg的 LPS 处理小鼠 12h 后，apoM+/+小鼠肾脏的 eNOS mRNA的表达水平较 LPS 处理前显著升高且差异具有统计学意义（n=8，P<0.05），而 apoM+/+小鼠肾脏的 eNOS mRNA 的表达水平在 LPS 处理前后无明显差异。apoM+/+小鼠 LPS处理组与相对应的 apoM-/-小鼠 LPS 处理组相比其肾脏的 eNOS mRNA 的表达水平显著升高，差异具有统计学意义（n=8，P<0.05）。双因素方差分析显示，apoM 和 LPS对 apoM+/+小鼠的 eNOS mRNA 表达水平的交互作用不具有统计学意义（P>0.05）。

apoM+/+小鼠与相应对照组的 apoM-/-小鼠肾脏的 eNOS mRNA 的表达相比无差异。采用 10mg/kg的 LPS 处理小鼠 12h 后，apoM+/+小鼠肾脏的 eNOS mRN的表达水平较 LPS 处理前显著升高且差异具有统计学意义（n=8，P<0.05），而 apoM+小鼠肾脏的 eNOS mRNA 的表达水平在 LPS 处理前后无明显差异。apoM+/+小鼠 LP处理组与相对应的 apoM-/-小鼠 LPS 处理组相比其肾脏的 eNOS mRNA 的表达水平显著升高，差异具有统计学意义（n=8，P<0.05）。双因素方差分析显示，apoM 和 LP对 apoM+/+小鼠的 eNOS mRNA 表达水平的交互作用不具有统计学意义（P>0.05）。

【参考文献】：
期刊论文
[1]肿瘤坏死因子α致HUVECs内皮型一氧化氮合酶降解[J]. 徐秀丹,夏勇,阎江洪,何岸,龙洋,罗素新.  基础医学与临床. 2017(08)
[2]载脂蛋白M对1–磷酸鞘氨醇受体–1表达的影响[J]. 王敏,罗光华,张友浦,黄波,于洋,刘宏,徐宁,张晓膺.  中华肥胖与代谢病电子杂志. 2017(02)
[3]载脂蛋白M对小鼠心肌炎症相关因子表达的影响[J]. 黄波,罗光华,张晓膺,狄冬梅.  中华实验外科杂志. 2017 (04)
[4]载脂蛋白M抑制脂多糖介导的核因子-κB及白细胞介素-1β的表达[J]. 邵朋朋,罗光华,刘中华,梁云,刘洪尧,王志刚,徐宁,张晓膺.  中华实验外科杂志. 2015 (08)
[5]泛素化和磷酸化协同作用调控蛋白质降解[J]. 易艳萍,曹诚,马清钧.  生物技术通讯. 2006(04)



本文编号：3623715