共抑制PD-1和CTLA-4的表达对小鼠H22肝癌的治疗作用

发布时间：2022-02-14 20:38

　　目的:本研究主要是通过RNA干扰技术将si RNA转染进入荷瘤小鼠的体内,从而下调PD-1和CTLA-4在荷瘤小鼠体内的表达,进而探讨共抑制PD-1和CTLA-4的表达对小鼠H22肝癌细胞生长的抑制作用。方法:将鼠源的H22肝癌细胞在ICR品系的小鼠腹腔内进行细胞培养并连续传代三次,再在另一只ICR品系的小鼠的右前肢腋下建立移植肿瘤动物模型。将成功荷瘤的小鼠随机分为四组:对照组（CT组）、si PD-1转染组（si PD-1组）、si CTLA-4转染组（si CTLA-4组）和联合转染组（si PD-1+si CTLA-4组）,使得每组荷瘤小鼠的肿瘤体积的大小基本保持一致。本实验主要是通过给每只荷瘤小鼠注射si RNAs和动物体内转染试剂进行实验,实验中每日观察小鼠的存活时间和基本的生理状况。测量实体瘤的体积和重量以评估si RNAs对肿瘤的抑制作用。酶联免疫吸附法（ELISA法）检测荷瘤小鼠血液中IFN-γ和IL-10的含量以及肿瘤组织和肝脏组织中PD-L1蛋白的表达量。利用实时荧光定量PCR技术（q PCR技术）检测肿瘤组织中IFN-γ、PD-L1、IL-6和Survivin,肝... 

【文章来源】：青岛大学山东省

【文章页数】：50 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

siPD-1 和 siCTLA-4 对荷瘤小鼠 H22移植瘤的抗肿瘤作用

图 2 ELISA 对荷瘤小鼠血清中 IFN-γ, IL-10 和组织中 PD-L1 蛋白表达含量的检测结果图 2AIFN-γ 在荷瘤小鼠血清中的表达含量 图 2B IL-10 在荷瘤小鼠血清中的表达含量图 2C PD-L1 蛋白在荷瘤小鼠肿瘤组织中的表达含量 图 2D PD-L1 蛋白在荷瘤小鼠肝脏组织的表达含量 与对照组相比之下，荷瘤小鼠血清中 IFN-γ，IL-10 和小鼠组织中 PD-L1 蛋白的达含量的检测结果显示出显著地差异(**: P<0.01, *: P <0.05)。4 组织中相关基因 mRNA 表达的测定

Bax和Bcl-2蛋白表达量由WesternBlot技术分析测定


本文编号：3625234